C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 17/08 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) B01D 15/08 (2006.01) C07K 1/22 (2006.01) C12N 11/08 (2006.01) G01N 33/545 (2006.01)
Patent
CA 2230557
The combination of the capabilities of stimuli-responsive components such as polymers and interactive molecules to form site-specific conjugates which are useful in a variety of assays, separations, processing, and other uses is disclosed. The polymer chain conformation and volume can be manipulated through alteration in pH, temperature, light, or other stimuli. The interactive molecules can be biomolecules like proteins or peptides, such as antibodies, receptors, or enzymes, polysaccharides or glycoproteins which specifically bind to ligands, or nucleic acids such as antisense, ribozymes, and aptamers, or ligands for organic or inorganic molecules in the environment or manufacturing processes. The stimuli-responsive polymers are coupled to the recognition biomolecules at a specific site so that the polymer can be manipulated by stimulation to alter ligand-biomolecule binding at an adjacent binding site, for example, the biotin binding site of streptavidin, the antigen-binding site of an antibody or the active, substrate-binding site of an enzyme. Binding may be completely blocked (i.e., the conjugate acts as an on-off switch) or partially blocked (i.e., the conjugate acts as a rheostat to partially block binding or to block binding only of larger ligands). Once a ligand is bound, it may also be ejected from the binding site by stimulating one (or more) conjugated polymers to cause ejection of the ligand and whatever is attached to it. Alternatively, selective partitioning, phase separation or precipitation of the polymer-conjugated biomolecule can be achieved through exposure of the stimulus-responsive component to an appropriate environmental stimulus.
L'invention concerne la combinaison des capacités de composants sensibles aux stimuli, tels que des polymères et des molécules interactives, à constituer des conjugués spécifiques de sites utiles dans une grande variété de dosages, séparations, traitement et autres utilisations. La conformation et le volume de la chaîne polymère peuvent être modifiés par le biais de changements de pH, de température, de lumière ou par d'autres stimuli. Les molécules interactives peuvent être des biomolécules comme des protéines ou des peptides tels que des anticorps, des récepteurs ou des enzymes, des polysaccharides ou des glycoprotéines se liant spécifiquement à des ligands, des acides nucléiques tels que des antisens, des ribozymes et des aptamères, ou des ligands pour molécules organiques ou inorganiques présentes dans l'environnement ou les processus de fabrication. Les polymères sensibles aux stimuli sont couplés aux biomolécules de reconnaissance au niveau d'un site spécifique, de façon que le polymère puisse être modifié par stimulation pour modifier la biomolécule-ligand fixée sur un site adjacent, par exemple sur le site de liaison de la biotine de la streptavidine, sur le site de fixation de l'antigène d'un anticorps ou sur le site actif fixant le substrat d'une enzyme. La fixation peut être bloquée totalement (c'est-à-dire que le conjugué se comporte comme un commutateur tout ou rien) ou partiellement (c'est-à-dire que le conjugué se comporte comme un rhéostat bloquant partiellement la fixation ou bloquant uniquement la fixation de ligands plus gros). Une fois le ligand fixé, il peut également être éjecté du site de fixation par la stimulation d'un (ou plusieurs) polymères conjugués, ce qui entraîne l'éjection du ligand et de tout ce qui lui est fixé. La séparation sélective, la séparation de phase ou la précipitation de la biomolécule conjuguée au polymère peut également se faire par exposition du composant sensible aux stimuli à un stimulus approprié provenant de l'environnement.
Hoffman Allan S.
Stayton Patrick S.
Bereskin & Parr Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
University Of Washington
LandOfFree
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