Intracellular complexes as biomarkers

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 33/48 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)

Patent

CA 2521106

The invention provides a method for determining a disease status of a patient by measuring expression levels of selected intracellular complexes. In one aspect of the invention, the activation status of apoptotic pathways in a patient sample is determined by measuring relative amounts of protein-protein complexes that are characteristic of the apoptotic pathways. In particular, the invention provides a method of determining the activation status of the mitochondrial apoptotic pathway by simultaneously measuring relative amounts of complexes between 14-3-3 proteins and BAD proteins on the one hand and complexes of Bcl-2 proteins and BAD proteins on the other hand. Preferably, methods of the invention are implemented by using sets of binding compounds having releasable molecular tags that are specific for multiple components of one or more complexes formed within apoptotic pathways. After binding molecular tags are released and separated from the assay mixture for analysis.

L'invention concerne un procédé permettant de déterminer l'état d'une maladie d'un patient et consistant à mesurer des niveaux d'expression de complexes intracellulaires sélectionnés. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'état d'activation des voies apoptotiques dans un échantillon du patient est déterminé par mesure des quantités relatives de complexes protéine-protéine caractéristiques des voies apoptotiques. Plus précisément, l'invention concerne un procédé permettant de déterminer l'état d'activation de la voie apoptotique mitochondriale, par mesure simultanée des quantités relatives des complexes entre des protéines 14-3-3 et des protéines BAD d'une part et des complexes de protéines Bcl-2 et de protéines BAD d'autre part. Les procédés selon l'invention sont mis en oeuvre, de préférence, au moyen d'ensembles de composés de liaison possédant des étiquettes moléculaires libérables spécifiques de composants multiples d'un ou de plusieurs complexes formés dans les voies apoptotiques. Après la liaison, les étiquettes moléculaires sont libérées et séparées du mélange d'essai aux fins d'analyse.

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