Isolating cells expressing secreted proteins

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/04 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C07K 14/315 (2006.01) C07K 14/52 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) C12N 5/02 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) G01N 33/554 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2434802

A method for identifying and isolating cells which produce secreted proteins. This method is based upon a specific characteristic or the expression level of the secreted protein by transiently capturing the secreted protein on the surface of an individual cell, allowing selection of rare cell clones from heterogeneous population. Also provided is the use of this method to generate cells which produce a desired level of secreted protein or secreted protein of a particular characteristic(s), and organisms which possess such cells. In particular, the method allows rapid isolation of high expression recombinant antibody-producing cell lines, or may be applied directly to rapid isolation of specific hybridomas, or to the isolation of antibody-producing transgenic animals. This method is applicable for any cell which secretes protein.

La présente invention concerne un procédé d'identification et d'isolement de cellules produisant des protéines sécrétées. Ce procédé s'appuie sur une caractéristique spécifique ou le niveau d'expression de la protéine sécrétée par une capture transitoire de la protéine sécrétée sur la surface d'une cellule prise isolément, ce qui permet de sélectionner des clones de cellules rares parmi une population hétérogène. L'invention concerne également l'utilisation de ce procédé pour générer des cellules qui produisent un niveau attendu de protéine sécrétée ou une protéine sécrétée présentant une caractéristique particulière, et des organismes qui possèdent de telles cellules. Le procédé permet plus particulièrement l'isolement rapide de lignées cellulaires produisant des anticorps de recombinaison à niveau d'expression élevé. Mis en oeuvre directement, le procédé convient également à l'isolement rapide d'hybridomes spécifiques ou à l'isolement d'animaux transgéniques produisant des anticorps. Ce procédé convient pour toute cellule sécrétrice de protéines.

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