Isolation and culturing of fetal cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/073 (2010.01) C12Q 1/04 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01)

Patent

CA 2413835

The present invention relates to a method for isolating fetal cells from maternal blood, wherein the blood sample has not been substantially enriched, such as by performing, on a sample of maternal blood from which at the most 50 % of the anucleated material cells thereof and/or at the most 50 % of the nucleated maternal cells thereof have been removed, selective labelling of fetal cells in the maternal blood sample, identifying the selectively labelled fetal cells, and specifically isolating substantially only the selectively labelled fetal cells. The selective labelling may be conducted with antibodies specific for the fetal cells and/or probes hybridising for example with fetal mRNA. Also, the invention relates to a method of diagnosing a disease in a fetus wherein the specifically labelling may then be conducted with a marker, such as a probe, to a gene or a gene mutation specific for the genetic disease or a chromosome abnormality to be diagnosed.

L'invention concerne un procédé d'isolation de cellules embryonnaires dans le sang maternel, sachant que l'échantillon de sang n'a pas été sensiblement enrichi, qui consiste par exemple à utiliser un échantillon de sang maternel dans lequel au plus 50 % des cellules anucléées et/ou au plus 50 % des cellules maternelles nucléées ont été éliminées, en vue d'effectuer sur cet échantillon un marquage sélectif de cellules embryonnaires, d'identifier les cellules embryonnaires soumises au marquage sélectif et, de manière spécifique, d'isoler sensiblement uniquement les cellules embryonnaires soumises à ce marquage sélectif. On peut effectuer ledit marquage avec des anticorps spécifiques vis-à-vis des cellules embryonnaires et/ou des sondes qui s'hybrident par exemple avec de l'ARNm embryonnaire. L'invention concerne en outre un procédé de diagnostic de maladie dans un foetus, qui consiste à prélever un échantillon de sang maternel, dans lequel au plus 50 % des cellules maternelles nucléées et/ou au plus 50 % des cellules maternelles anucléées ont été éliminées, en vue d'effectuer sur cet échantillon un marquage sélectif de cellules embryonnaires, d'identifier les cellules embryonnaires soumises au marquage sélectif, de marquer spécifiquement avec au moins un marqueur de maladie les cellules embryonnaires identifiées pour déceler des maladies, et d'identifier spécifiquement les cellules marquées. On peut accomplir ledit marquage avec un marqueur, du type sonde, par rapport à un gène ou une mutation de gène spécifique à la maladie génétique ou à l'anomalie chromosomique pour laquelle le diagnostic est effectué.

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