Isolation of immunoglobulins

Details Isolation of immunoglobulins Isolation of immunoglobulins

C - Chemistry, Metallurgy

07

K

C07K 1/22 (2006.01) B01D 15/00 (2006.01) B01J 20/32 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) B01D 15/18 (2006.01) B01D 15/38 (2006.01)

Patent

CA 2264177

The present invention relates to a novel method for the isolation or purification of immunoglobulins (a special class of proteins) from a solution containing immunoglobulins, e.g. hybridoma cell culture supernatants, animal plasma or sera, or colostrum. The method includes the use of a minimum of salts, such as lyotropic salts, in the binding process and preferably also the use of small amounts of organic solvents in the elution process. The solid phase matrices, preferably epichlorohydrin activated agarose matricees, are functionalised with mono- or bicyclic aromatic or heteroaromatic ligands (molecular weight: at the most 500 Dalton) which, preferably, comprises an acidic substituent, e.g. a carboxylic acid. The matrices utilised show excellent properties in a "Standard Immunoglobulin Binding Test" and in a "Monoclonal Antibody Array Binding Test" with respect to binding efficiency and purity, and are stable in 1M NaOH.

La présente invention concerne un nouveau procédé d'isolement ou de purification d'immunoglobulines (classe spéciale de protéines) à partir d'une solution contenant celles-ci, par exemple à partir de surnageants de culture cellulaire hybridome, de plasma ou de sérums animaux, ou de colostrum. Ce procédé implique l'utilisation d'un minimum de sels, tels que des sels lyotropes, dans le processus de fixation ainsi que, de préférence, l'utilisation de petites quantités de solvants organiques dans le processus d'élution. On fonctionnalise les matrices en phase solide, de préférence des matrices d'agarose activé par épichlorohydrine, à l'aide de ligands aromatiques ou hétéro-aromatiques mono ou bicycliques (possédant une masse moléculaire d'au maximum 500 daltons), lesquels comprennent préférablement un substituant acide, par exemple un acide carboxylique. Les matrices utilisées présentent d'excellentes propriétés dans un test classique de fixation d'immunoglobulines et dans un test de fixation d'une série d'anticorps monoclonaux, sous le rapport de l'efficacité de fixation et de la pureté, et elles sont stables dans une solution à 1M de NaOH.

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