Isolation of mammalian hematopoietic stem cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 5/08 (2006.01) A61K 35/28 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2223492

The present invention relates to a method of purifying mammalian hematopoietic stem cells from a bone marrow cell population. The present invention also relates to a method of separating cycling HSCs from quiescent HSCs in a purified mammalian HSC sample. Further, the invention relates to a method of identifying an agent which is a fluorescent, vital dye which is lipophilic for use in purifying mammalian HSCs. The present invention also relates to a method of transplanting bone marrow in a mammalian host, such as a human, comprising introducing into the host the purified HSCs described herein. The invention further relates to a method of in vivo administration of a protein comprising transfecting a purified HSC with a construct comprising DNA which encodes a protein of interest and then introducing the stem cell into the host where the protein of interest is expressed. The present invention also relates to hematopoietic stem cells purified using the methods described herein.

Un procédé permet de purifier des cellules souches hématopoïétiques mammaliennes provenant d'une population de cellules de moëlle osseuse. Un autre procédé permet de séparer des cellules souches hématopoïétiques actives de celles qui sont quiescentes dans un échantillon de ces cellules purifiées mammaliennes. On décrit aussi un procédé d'identification d'un agent qui est un colorant vital fluorescent et lipophile qu'on utilise pour purifier ces cellules mammaliennes, ainsi qu'un procédé de greffe de moëlle osseuse chez un mammifère, tel qu'un être humain, procédé qui consiste à introduire chez l'hôte les cellules souches hématopoïétiques purifiées décrites. On décrit en outre un procédé d'administration in vivo d'une protéine, qui consiste à transfecter une cellule souche hématopoïétique purifiée avec un produit d'assemblage comprenant de l'ADN qui code une protéine souhaitée, puis à introduire cette cellule souche chez l'hôte où cette protéine s'exprime. On décrit aussi des cellules souches hématopoïétiques purifiées à l'aide des procédés décrits.

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