C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
K
C07K 19/00 (2006.01) C07K 1/107 (2006.01) C07K 1/13 (2006.01) C09B 23/10 (2006.01) C12Q 1/48 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/532 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)
Patent
CA 2415960
The invention provides peptide synthons having protected functional groups for attachment of desired moieties (e.g. functional molecules or probes). Also provided are peptide conjugates prepared from such synthons, and synthon and conjugate preparation methods including procedures for identifying optimum probe attachment sites. Biosensors are provided having functional molecules that can locate and bind to specific biomolecules within living cells. Biosensors can detect chemical and physiological changes in those biomolecules as living cells are moving, metabolizing and reacting to its environment. Methods are included for detecting GTP activation of a Pho GTP are protein using polypeptide biosensors. When the biosensor binds GTP-activated Rho GTPase protein, an environmentally sensitive dye emits a signal of a different lifetime, intensity or wavelength than when not bound. New fluorophores whose fluorescence responds to environmental changes are also provided that have improved detection and attachment properties, and that can be used in living cells, or in vitro.
L'invention concerne des synthons de peptides présentant des groupes fonctionnels protégés permettant une liaison à des fractions désirées (par exemple des molécules ou des sondes fonctionnelles). L'invention concerne également des conjugués de peptides préparés à partir de tels synthons, et des procédés de préparation de synthons et de conjugués comprenant des procédés permettant l'identification des sites de fixation de sondes optimaux. L'invention concerne des biodétecteurs présentant des molécules fonctionnelles pouvant localiser des biomolécules spécifiques et se lier avec elles à l'intérieur de cellules vivantes. Les biodétecteurs peuvent détecter des changements chimiques et physiologiques dans ces biomolécules puisque les cellules vivantes bougent, métabolisent et réagissent à leur environnement. L'invention concerne également des procédés permettant de détecter l'activation par GTP d'une protéine RhoGTPase utilisant des biodétecteurs de polypeptides. Lorsque le biodétecteur se lie à la protéine RhoGTPase activée par GTP, un colorant sensible à son environnement émet un signal d'une durée de vie d'une intensité ou d'une longueur d'onde différentes de celles du signal qu'il émet lorsqu'il n'est pas lié. L'invention concerne également de nouveaux fluorophores dont la fluorescence répond à des changements environnementaux qui présentent des propriétés de détection et de liaison améliorées, et qui peuvent être utilisés dans des cellules vivantes, ou in vitro.
Bark Steven J.
Burton Dennis R.
Chamberlain Chester
Hahn Klaus M.
Kraynov Vadim
Gowling Lafleur Henderson Llp
The Scripps Research Institute
LandOfFree
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