Large volume ex vivo electroporation method

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 13/00 (2006.01) A61N 1/30 (2006.01) C12M 1/42 (2006.01)

Patent

CA 2519065

An object of the invention is to provide an electroporation method for treating vesicles with exogenous material for insertion of the exogenous material into the vesicles which includes the steps of: a. retaining a suspension of the vesicles and the exogenous material in a treatment volume in a chamber which includes electrodes, wherein the chamber has a geometric factor (cm-1) defined by the quotient of the electrode gap squared (cm2) divided by the chamber volume (cm3), wherein the geometric factor is less than or equal to 0.1 cm-1 , wherein the suspension of the vesicles and the exogenous material is in a medium which is adjusted such that the medium has conductivity in a range spanning 0.01 to 1.0 milliSiemens, wherein the suspension is enclosed in the chamber during treatment, and b. treating the suspension enclosed in the chamber with one or more pulsed electric fields. With the method, the treatment volume of the suspension is scalable, and the time of treatment of the vesicles in the chamber is substantially uniform.

La présente invention a trait à un procédé d'électroporation pour le traitement de vésicules avec une matière exogène pour l'insertion d'une matière exogène dans les vésicules comprenant les étapes suivantes : (a) le maintien d'une suspension des vésicules et de la matière exogène dans un volume de traitement dans une enceinte comportant des électrodes, l'enceinte ayant un facteur géométrique (cm?-1¿) défini par le quotient de la distance entre les électrodes au carré (cm?2¿) divisé par le volume de l'enceinte (cm?3¿), dans lequel le facteur géométrique est inférieur ou égal à 0,1 cm?-1¿, dans lequel la suspension des vésicules et de matière exogène se trouve dans un milieu qui est ajusté de sorte que le milieu présente une conductivité dans une plage de 0,01 à 1,0 milliSiemens, dans lequel la suspension est contenue dans l'enceinte lors du traitement ; et (b) le traitement de la suspension contenue dans l'enceinte avec un ou des champs électriques. Avec ce procédé, le volume de traitement de la suspension est capable d'être mis à l'échelle, et le temps de traitement des vésicules dans l'enceinte est sensiblement uniforme.

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