Late-pcr

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C07H 19/00 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)

Patent

CA 2511128

A non-symmetric polymerase chain reaction (PCR) amplification method employing a limiting primer in low concentration whose concentration-adjusted melting point at least equals, and preferably exceeds, that of the excess primer, the latter in turn not being more than 25~C below the melting temperature of the amplicon. Assays employing such amplification and labeled hybridization probes, including assays that include a detection step following primer extension or a low-temperature probe, or both. Kits for performing such assays and primer or primer~and-probe sets for performing the foregoing amplifications and assays.

L'invention concerne un procédé d'amplification de la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) non symétrique au moyen d'une amorce limitante en faible concentration dont le point de fusion ajusté à la concentration est au moins égale et, de préférence, excède celle de l'amorce en excès, cette dernière étant à son tour supérieure à 25 ·C au-dessus de la température de fusion de l'amplicon. Des dosages utilisant de telles sondes d'amplification et d'hybridation marquées, notamment des dosages comprenant une étape de détection suivant l'extension de l'armorce ou une sonde à basse température, ou les deux. L'invention concerne également des nécessaires destinés à mettre en oeuvre ces dosages et ces ensembles amorce ou amorce et sonde en vue d'exécuter les applications et les dosages susmentionnés.

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