Ligand-mediated immunofunctional hormone binding protein...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

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C12N 5/18 (2006.01) A61K 38/27 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) C07K 16/28 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01) G01N 33/74 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2093927

A ligand-mediated immunofunctional assay (LIFA) method for detecting the presence and the concentration of polypeptide hormone binding proteins which comprises capturing the binding protein with a solid phase bound first antibody, saturating the bound hormone binding protein with the ligand polypeptide hormone, and detecting the bound ligand polypeptide hormone with a detestably labeled second antibody specific for the ligand polypeptide hormone. In the absence of added saturating polypeptide hormone, the LIFA measures the amount of hormone binding protein bound to the endogenous ligand polypeptide hormone. A growth hormone binding protein assay illustrates the method of the present invention. LIFA assay results indicate that increased binding protein substantially increases growth hormone activity. Methods of use and formulations of growth hormone binding protein, growth hormone, insulin-like growth factor-I and insulin-like growth factor binding protein are disclosed.

Procédé de dosage immunofonctionnel induit par ligands (LIFA) permettant de détecter la présence et la concentration de protéines de liaison d'hormones polypeptidiques consistant à capturer la protéine de liaison à l'aide d'un premier anticorps lié à une phase solide, à saturer la protéine de liaison d'hormones avec l'hormone polypeptidique de ligand, et à détecter l'hormone polypeptidique de ligands liée à l'aide d'un second anticorps marqué de manière détectable et spécifique de l'hormone polypeptidique de ligands. En l'absence d'hormone polypeptidique de saturation ajoutée, le LIFA mesure la quantité de protéines de liaison d'hormones liées à l'hormone polypeptidique de ligands endogènes . Un dosage de protéines de liaison d'hormones de croissance illustre le procédé de l'invention. Les résultats du dosage LIFA indiquent qu'une protéine de liaison accrue augmente sensiblement l'activité de l'hormone de croissance. L'invention concerne également des procédés d'utilisation ainsi que des formulations de protéine de liaison d'hormone de croissance, d'hormone de croissance, de facteur-I de croissance analogue à l'insuline et de protéine de liaison de facteur de croissance analogue à l'insuline.

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