Luciferases

Details Luciferases Luciferases

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/53 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2186144

Proteins are provided having luciferase activity with greater heat stability than wildtype luciferases by replacing the glutamate equivalent to that at position 354 of Photinus pyralis luciferase or 356 of Luciola luciferases with an alternative amino acid, particularly lysine. DNA, vectors and cells that encode for and express the proteins are also provided as are test kits and reagents for carrying out luminescence assays using the proteins of the invention. Preferred proteins have a second replaced amino acid at a position equivalent to position 215 of Photinus pyralis luciferase or 217 of Luciola luciferases.

L'invention concerne des protéines présentant une activité de luciférase et une stabilité à la chaleur plus grande que les luciférases sauvages. On obtient ces protéines en remplaçant le glutamate équivalant à la position 354 de la luciférase Photinus pyralis ou la position 356 des luciférases Luciola par un acide aminé de remplacement, en particulier de la lysine. L'invention porte également sur de l'ADN, des vecteurs et des cellules codant pour et exprimant lesdites protéines ainsi que des matériels d'essai et des réactifs utilisés pour réaliser des examens par luminescence au moyen des protéines selon l'invention. Les protéines préférées comprennent un second acide aminé de remplacement en une position équivalant à la position 215 de la luciférase Photinus pyralis ou 217 de luciférases luciola.

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