C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/078 (2010.01) A61K 31/6615 (2006.01) A61K 35/18 (2006.01) A61K 38/50 (2006.01) C12M 3/00 (2006.01) C12N 1/06 (2006.01)
Patent
CA 2575617
Lysis/resealing process for preparing erythrocytes which contain an active ingredient (e.g. aspariginase or inositol hexaphosphate), the process cornprising the following steps: (1) placing a globular concentrate in suspension in an isotonic solution having a haematocrit level which is equal to or greater than 65 %, with refrigeration at from + 1 to + 8 ~C, (2) measuring the osmotic fragility based on a sample of erythrocytes from that same globular concentrate, preferably on a sample of the suspension obtained in step (1), (3) lysis and internalisation procedure of the active ingredient, inside the same chamber, at a temperature which is constantly maintained at from + 1 to + 8 ~C, comprising allowing the erythrocyte suspension having a haematocrit level which -is equal to or greater than 65% and a hypotonic lysis solution which is refrigerated at from + 1 to + 8 ~C to circulate in a dialysis cartridge ; the lysis parameters being adjusted in accordance with the osmotic fragility previously measured; and (4) resealing procedure carried out in a second chamber at a temperature of from + 30 to + 40 ~C by means of a hypertonic solution.
La présente invention se rapporte à un procédé de lyse/rescellement qui permet de préparer des globules rouges contenant un ingrédient actif. Le procédé selon l'invention comprend les étapes consistant : (1) à placer un concentré globulaire en suspension dans une solution isotonique présentant un niveau d'hématocrite égal ou supérieur à 65 %, réfrigérée à une température comprise entre +1 et +8 °C ; (2) à mesurer la fragilité osmotique sur la base d'un échantillon de globules rouges issus dudit concentré globulaire, de préférence d'un échantillon de la suspension obtenue à l'étape (1) ; (3) à procéder à la lyse et à l'internalisation de l'ingrédient actif, à l'intérieur de la même chambre, à une température maintenue de manière constante entre +1 et +8 °C, en permettant à la suspension de globules rouges présentant un niveau d'hématocrite égal ou supérieur à 65 % et à une solution de lyse hypotonique réfrigérée à une température comprise entre +1 et +8 °C de circuler dans une cartouche de dialyse, les paramètres de lyse étant réglés en fonction de la fragilité osmotique précédemment mesurée ; et (4) à procéder au rescellement dans une seconde chambre, à une température comprise entre +30 et +40 °C, à l'aide d'une solution hypertonique.
Erytech Pharma
Robic
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1441830