C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/09 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2501708
It is intended to provide an artificial mammalian chromosome which is stably held in mammalian cells and allows efficient expression of a target gene carried thereby. Namely, a first cyclic vector containing a mammalian centromere sequence and a selection marker gene and a second cyclic vector containing a functional sequence are transferred into mammalian host cells. Then transformed cells are selected by using the above-described selection marker gene and cells holding an artificial mammalian chromosome are selected from among the transformed cells thus selected. Thus, it is possible to construct an artificial mammalian chromosome which has a mammalian replication origin, the mammalian centromere sequence and the functional sequence, is in a cyclic form, can be replicated in mammalian cells, extrachromosomally held in the host cells and transferred to daughter cells in cell division.
La présente invention concerne un chromosome mammifère artificiel qui est présent de façon stable dans des cellules mammifères et permet d'obtenir une expression efficace d'un gène cible porté par ledit chromosome. De manière plus spécifique, un premier vecteur cyclique contenant une séquence de centromère de mammifère et un gène marqueur de sélection ainsi qu'un deuxième vecteur cyclique contenant une séquence fonctionnelle sont transmis dans des cellules hôtes mammifères. Les cellules ainsi modifiées sont ensuite sélectionnées à l'aide du gène marqueur de sélection susmentionné et les cellules contenant un chromosome mammifère artificiel sont sélectionnées parmi les cellules modifiées ainsi sélectionnées. Il est ainsi possible de créer un chromosome mammifère artificiel qui comprend une origine de réplication mammifère, une séquence de centromère de mammifère et la séquence fonctionnelle, qui se présente sous une forme cyclique, qui peut être répliqué dans des cellules mammifères, qui peut être présent de manière extrachromosomique dans les cellules hôtes et qui peut être transmis dans des cellules filles pendant la division cellulaire.
Ikeno Masashi
Itou Toshihide
Okazaki Tsuneko
Suzuki Nobutaka
Japan Science And Technology Agency
Nelligan O'brien Payne Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1568623