C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/0783 (2010.01) C12N 5/071 (2010.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)
Patent
CA 2511520
The present invention describes methods and processes for the production of proteins, particularly glycoproteins, by animal cell or mammalian cell culture, preferably, but not limited to, fed-batch cell cultures. In one aspect, the methods comprise at least two temperature shifts performed during the culturing period, in which the temperature is lower at the end of the culturing period than at the time of initial cell culture. Throughout their duration, the culturing processes of the invention involving two or more downward shifts in temperature sustain a high viability of the cultured cells, and can yield an increased end titer of protein product, and a high quality of protein product, as determined, e.g., by sialic acid content of the produced protein. In another aspect, the methods comprise the delayed addition of polyanionic compound during the culturing period. The delayed addition of polyanionic compound sustains a high viability of the cultured cells, and can extend the growth phase, delay the onset of the death phase, and arrest the death phase.
La présente invention concerne des méthodes et des processus de production de protéines, en particulier de glycoprotéines, par culture de cellules animales ou de cellules de mammifères, de préférence, mais ne se limitant pas, à des cultures de cellules à écoulement discontinu. Selon un aspect, lesdites méthodes font appel à au moins deux variations de température mises en oeuvre au cours de la période de culture, dans lesquelles la température est plus basse à la fin de la période de culture que lors du départ de la culture de cellules. Sur toute leur durée, les processus de culture selon l'invention impliquant au moins deux variations de température vers le bas permettent de maintenir une viabilité élevée des cellules cultivées, et peuvent produire un titre final plus élevé de produit protéique, et une qualité élevée de produit protéique, tel que déterminé, par exemple, par la teneur en acide sialique de la protéine produite. Selon un autre aspect, lesdites méthodes font appel à l'addition différée d'un composé polyanionique au cours de la période de culture. L'addition différée d'un composé polyanionique permet de maintenir une viabilité élevée des cellules cultivées, et permet d'étendre la phase de croissance, de retarder l'apparition de la phase de déclin et d'arrêter la phase de déclin.
Basch Jonathan D.
Burnett William V. Jr.
Joosten Christoph E.
Lee Steven S.
Matlock Linda
Bristol-Myers Squibb Company
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2022583