G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 21/64 (2006.01) G01N 27/447 (2006.01)
Patent
CA 2343700
Improved apparatus is disclosed for carrying out axially illuminated laser induced fluorescence whole-column imaging detection in the capillary isoelectric focusing of proteins. The separation capillary was made of low refractive index Teflon* conditioned with methylcellulose to reduce electro-osmotic flow and a small amount of high refractive index organic solvent (glycerol) was added to the sample mixture. It was found that an axially directed laser excitation beam was propagated essentially with total internal reflection, so that minimum interference arose from stray light or from scattering light originating from the wall of the capillary. With the naturally fluorescent protein R-phycoerythrin, a concentration detection limit LOD (Limits of Detection) 10 -11 M or mass LOD 10 -17 Mo was obtained.
La présente invention décrit un appareil amélioré pour exécuter la détection par imagerie de la colonne entière de fluorescence induite par un laser éclairé axialement dans l'électrofocalisation capillaire de protéines. Le capillaire de séparation était fait de Téflon* à faible indice de réfraction traité à la méthylcellulose afin de réduire le flux électro-osmotique, et une petite quantité de solvant organique (glycerol) à indice de réfraction élevé a été ajoutée au mélange de l'échantillon. Il a été constaté qu'un faisceau d'excitation laser dirigé axialement se propageait essentiellement avec la réflexion interne totale, de sorte qu'une interférence minimale provenait de la lumière parasite ou de la lumière diffuse émanant de la paroi du capillaire. Avec la protéine R-phycoerythrin naturellement fluorescente, on a obtenu une limite de détection de concentration LOD 10 -11 M ou de masse LOD 10 -17 Mo.
Huang Tiemin
Pawliszyn Janusz
Wu Xing-Zheng
Huang Tiemin
Na
Pawliszyn Janusz
Wu Xing-Zheng
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