Metal chelates and methods of using them for time-resolved...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – C

Patent

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C07C 49/115 (2006.01) A61K 31/74 (2006.01) B01J 10/00 (2006.01) C07C 45/45 (2006.01) C07C 49/788 (2006.01) C07C 49/813 (2006.01) C07C 49/92 (2006.01) C07C 51/44 (2006.01) C07C 225/22 (2006.01) C07C 255/56 (2006.01) C07D 213/50 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01)

Patent

CA 2502959

.beta.-diketone fluorescent tags are disclosed, particularly those enabling the use of excitation energy in the near visible or visible spectrum. In some cases, these tags allow the use of cost-effective excitation devices such as LED~s. The compounds form fluorescent chelates (complexes) with lanthanide (III) rare earth metal ions (such as EU3+). The fluorescent complex may be included in a latex microparticle, such as a styrene latex particle. Ideally, the complex has an absorption maximum .lambda. equal to or greater than 360 nm, and the compound is characterized by a pKa <9Ø Kits and methods for detecting target molecules (e.g. immunoassays) are also disclosed. Such methods and kits typically use a ligand for binding to the target molecule and a labeling agent attached to the ligand. The fluorescent complexes described above are at least part of the labeling agent. Apparatus for detecting fluorescence from a sample includes an irradiating energy source that produces irradiating energy .lambda. equal to or greater than 360 nm; a detector positioned to detect fluorescence from the sample; and a sample holder for holding the sample in position to be irradiated by the energy source. A light- emitting diode is preferably used as the irradiating energy source.

L'invention concerne des étiquettes fluorescentes de .beta.-dicétone, plus spécifiquement celles qui permettent l'utilisation d'une énergie d'excitation dans le spectre visible ou quasi-visible. Dans certains cas, ces étiquettes permettent l'utilisation de dispositifs économiques tels que des diodes électroluminescentes (DEL). Ces composés forment des chélates fluorescents (complexes) avec des ions métalliques de terre rare de lanthanide (III) (tels que EU3+). Ce complexe fluorescent peut être compris dans une microparticule de latex, telle qu'une particule de latex styrène. Idéalement, ce complexe présente un maximum d'absorption .lambda. égal ou supérieur à 360 nm, et il est caractérisé par un pKa < 9,0. L'invention concerne également des kits et des procédés permettant de détecter des molécules cibles (par ex. dans des dosages immunologiques). Typiquement de tels procédés et kits mettent en oeuvre un ligand pour se lier à la molécule cible et un agent de marquage attaché au ligand. Les complexes fluorescents décrits ci-dessus représentent au moins une partie de l'agent de marquage. Un appareil destiné à détecter la fluorescence d'un échantillon comprend une source d'énergie irradiante produisant une énergie irradiante .lambda. égale ou supérieure à 360 nm, un détecteur placé de façon à détecter la fluorescence de l'échantillon et un support d'échantillon destiné à maintenir l'échantillon en position afin que ce dernier soit irradié par la source d'énergie. De préférence, une diode électroluminescente est utilisée en tant que source d'énergie irradiante.

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