C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/87 (2006.01) A61N 1/32 (2006.01) C12M 3/00 (2006.01)
Patent
CA 2565793
A method and apparatus for electroporation includes placing a mixture of bacterial suspension and transforming DNA into an electroporation cuvette. The resulting sample is subjected through a current-limiting device to a complex 5 waveform including a burst of high-voltage radio-frequency current, which in some embodiments is superimposed on a biphasic high-voltage DC pulse, and in other embodiments on a high-voltage lower-frequency AC burst. The total waveform has at least an initial portion greater than eleven thousand volts per centimeter of electrode spacing, and a later portion in some embodiments is reduced to less than thirty percent 10 of magnitude of the initial portion. Transformed bacteria are selected by culture in selective medium in an embodiment. The high-voltage radio-frequency current is between 3 and 125 MHz, and in an embodiment is 24 MHz.
Procédé et dispositif d'électroporation consistant à placer un mélange de suspension bactérienne dans une cuvette d'électroporation et à transformer l'ADN. L'échantillon ainsi obtenu est soumis via un dispositif limiteur de courant à une forme d'onde complexe comprenant une rafale d'un courant haute tension à fréquence radio-électrique qui, dans certains modes de réalisation, vient se superposer à une pulsation CC haute tension biphasique, et dans d'autres modes de réalisation, à une rafale de courant AC haute tension de basse fréquence. La forme d'onde totale comporte au moins une partie initiale supérieure à onze mille volts par centimètre d'espacement entre électrodes et dans une portion ultérieure d'autres modes de réalisation est réduite à moins de 30 % de la grandeur de la portion initiale. Dans un mode de réalisation, les bactéries transformées sont sélectionnées par culture dans un milieu sélectif. Le courant haute tension à fréquence radio-électrique se situe entre 3 et 125 MHz et est de 24 MHz dans un mode de réalisation.
Lynd Lee R.
Sullivan Charles R.
Tyurin Mikhail V.
Smart & Biggar
The Trustees Of Dartmouth College
LandOfFree
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