Method and apparatus for separating biological molecules

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 1/28 (2006.01) C07K 1/24 (2006.01) G01N 27/447 (2006.01)

Patent

CA 2431357

A system for separating biological molecules includes a chip (10)on which there is an electrophoresis separation microchannel (16). At the start of the channel there is an isolectric focusing section (14) containing a gel having a pH gradient. Molecules to be separated are placed in the focusing section (14) and move to an equilibrium position under the influence of an electric field. The electrophoretic state of the molecules is then changed, and a high voltage potential applied across the entire length of the focusing and separation sections. The molecules migrate under the influence of the electric field from the focusing section into the separation section where their position and velocity are tracked.From a knowledge of position and velocity, a user can determine both charge/mass ratio and isoelectric equilibrium point for each molecule. The gels can be replicated in the chip to allow parallel analysis, and hence comparisons, to take place.

L'invention concerne un système servant à séparer des molécules biologiques, qui comprend une puce (10) sur laquelle est ménagé un microcanal de séparation par électrophorèse (16). Le début du canal présente une section de concentration isoélectrique (14) qui contient un gel présentant un gradient de pH. Les molécules à séparer sont placées dans la section de concentration (14) et se déplacent vers une position d'équilibre sous l'effet d'un champ électrique. L'état électrophorétique des molécules est ensuite modifié et un potentiel haute tension appliqué sur toute la longueur de la section de concentration et de la section de séparation. Les molécules migrent sous l'effet du champ électrique de la section de concentration à la section de séparation où leur position et leur vitesse sont établies. Une fois la position et la vitesse connues, un usager peut déterminer tant le rapport charge/masse que le point d'équilibre isoélectrique de chaque molécule. Les gels peuvent être répétés dans la puce pour permettre d'effectuer une analyse parallèle, et donc d'établir des comparaisons.

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