Method and apparatus for thermal cycling and for automated...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 19/34 (2006.01) B01L 7/00 (2006.01) C12M 1/40 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01) G01N 35/00 (2006.01)

Patent

CA 2252571

An apparatus and method for thermally cycling a reaction mixture in a reaction vessel to expose the mixture to the varying temperatures necessary to, for example, achieve PCR amplification or the preparation of sequencing fragments using a cycle sequencing operation makes use of flow-through reaction vessels, such as capillary tubes, for the preparation and thermal cycling of reaction mixtures. In order to prevent loss of the reaction mixture from the vessels during heating, the thermal cycling apparatus of the invention provides means for reversibly sealing the proximal and distal ends of each reaction vessel. The proximal ends can be sealed by coupling to a pump which permits movement of the samples within the reaction vessels. As to the distal ends, the reaction vessels can be sealed by pressing the distal end of each vessel against a sealing element with a conformable surface, or by immersing the distal end of each vessel in the reservoir of liquid, preferably of an oil, that is not miscible with the reaction mixture.

On décrit un dispositif et un procédé de cyclisation thermique d'un mélange réactionnel, dans un récipient de réaction, afin d'exposer ce mélange à des températures variables, nécessaires, par exemple, pour exécuter une amplification PCR ou pour préparer des fragments de séquençage à l'aide d'une technique de séquençage par cycles. Ce procédé de cyclisation consiste à utiliser des récipients de réaction à écoulement traversant, tels que des tubes capillaires, pour la préparation et le cyclisation thermique des mélanges réactionnels. Afin d'empêcher toute perte du mélange réactionnel à partir des récipients de réaction, lors du chauffage, l'appareil de cyclisation thermique de l'invention est pourvu de moyens destinés à sceller de manière réversible les extrémités distale et proximale de chaque récipient de réaction. On peut sceller l'extrémité proximale en la couplant à une pompe qui permet la circulation des échantillons à l'intérieur des récipients de réaction. Quant à l'extrémité distale des récipients de réaction, on peut la sceller en la comprimant contre un élément de scellement présentant une surface adaptable, ou en l'immergeant dans un réservoir de liquide, de préférence une huile, qui n'est pas miscible avec le mélange réactionnel.

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