Method and apparatus useful for detecting bloodgroup...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/555 (2006.01) G01N 33/49 (2006.01) G01N 33/80 (2006.01)

Patent

CA 2266674

Disclosed are a method and apparatus for detecting bloodgroup antigens and antibodies. The method is a direct or indirect assay. The direct assay comprises adding a sample of erythrocytes to a reaction tube with two layers of immunoreactive particles, a first having Protein G and a second having Protein A coupled thereto. Antibodies specific for bloodgroup antigens are coupled to the ligand on the particles. The reaction tube is then centrifuged to force to the bottom of the tube erythrocytes not attached to antibodies on the particles. The indirect assay comprises obtaining erythrocytes, serum or plasma samples and mixing these with a known antibody or antigen, depending on whether antigens or antibodies are being detected. The mixture is incubated in a reaction tube above two layers of particles, a first having Protein G and a second having Protein A coupled thereto. The tube is centrifuged to force to the bottom of the tube erythrocytes not attached to ligands on the particles. A positive response yields a visually detectable line or zone of bound erythrocytes in the particles. A negative response yields a visually detectable zone of nonbinding erythrocytes at the bottom of the tube.

On décrit un procédé et un dispositif de détection d'antigènes et d'anticorps de groupes sanguins, ce procédé consistant en un dosage direct ou indirect. Le dosage direct comprend les étapes consistant à ajouter un échantillon d'érythrocytes dans un tube de réaction comprenant deux couches de particules immunoréactives, une première couche à laquelle on a couplé une protéine G et une seconde couche à laquelle on a couplé une protéine A, des anticorps spécifiques d'antigènes de groupes sanguins étant couplés au ligand sur ces particules, puis à centrifuger le tube de réaction, afin de pousser vers le fond de celui-ci les érythrocytes qui ne se sont pas attachés auxdits anticorps. Le dosage indirect comprend les étapes consistant à obtenir des échantillons d'érythrocytes, de sérum ou de plasma, et à mélanger ceux-ci avec un anticorps ou antigène connu, en fonction de la détection ou non d'antigènes ou d'anticorps, puis à incuber le mélange dans un tube de réaction au-dessus de deux couches de particules, une première couche à laquelle on a couplé une protéine G et une seconde couche à laquelle on a couplé une protéine A, et à centrifuger le tube afin de pousser vers le fond de celui-ci les érythrocytes qui ne se sont pas attachés auxdits anticorps. Une réponse positive donne une ligne ou zone visuellement détectable d'érythrocytes fixés sur les particules et une réponse négative donne, dans le fond du tube, une zone visiblement détectable d'érythrocytes ne se fixant pas.

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