G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)
Patent
CA 2322282
Provided is a novel method for differentially detecting and enumerating metastatic cells present in a sample of a complex biological fluid, comprising the steps of obtaining a sample of body fluid from an individual, adding to the sample at least two detector molecules, wherein a first detector molecule has binding specificity for a cell molecule comprising IL-2Ra, and a second detector molecule has binding affinity for a cell molecule comprising an epithelial cell antigen, and the detectable moiety on the first detector molecule has a peak emission spectrum which is distinguishable from the peak emission spectrum of the detectable moiety on the second detector molecule; and analyzing cells present in the sample in a flow cytometer which is capable of detecting and distinguishing the emission spectra of the first and second detector molecules, and light scattering for each cell present in the sample. Also provided is a clinical diagnostic kit comprising a detector molecule having binding specificity for human IL-2Ra, and a detector molecule having binding specificity for an epithelial cell antigen expressed by human cells, wherein the detectable moiety on the detector molecule having binding specificity for human IL-2Ra has a peak emission spectrum which is distinguishable from the peak emission spectrum of the detectable moiety on the detector molecule having binding specificity for an epithelial cell antigen expressed by human cells. The figure is a histogram showing an epithelial cell antigen (Ber-EP4 + gataed cells (FS)) and IL-2Ra + cells (CD25).
L'invention concerne une nouvelle méthode de détection et de dénombrement différentiels de cellules métastatiques présentes dans un échantillon de fluide biologique complexe, la méthode consistant à obtenir un échantillon de liquide organique provenant d'un individu; à ajouter à l'échantillon au moins deux molécules de détection, une première molécule de détection présentant une spécificité de liaison à une molécule cellulaire comprenant IL-2Ra, et une deuxième molécule de détection présentant une spécificité de liaison à une molécule cellulaire comprenant un antigène de cellule épithéliale et la fraction détectable de la première molécule de détection possédant un spectre d'émission maximal pouvant être distingué du spectre d'émission maximal de la fraction détectable de la deuxième molécule de détection; puis à analyser les cellules présentes dans l'échantillon dans un cytomètre de flux capable de détecter et de distinguer les spectres d'émission des première et deuxième molécules de détection et la diffusion de lumière de chaque cellule présente dans l'échantillon. L'invention concerne également une trousse de diagnostic clinique comprenant une molécule de détection présentant une spécificité de liaison avec IL-2Ra humain, et une molécule de détection présentant une spécificité de liaison avec un antigène de cellule épithéliale exprimé par des cellules humaines, la fraction détectable de la molécule de détection qui présente une spécificité de liaison avec IL-2Ra humain, possédant un spectre d'émission maximal pouvant être distingué du spectre d'émission maximal de la fraction détectable de la molécule de détection possédant une spécificité de liaison avec un antigène de cellule épithéliale exprimé par des cellules humaines. Le dessin constitue un histogramme représentant un antigène de cellule épithéliale (Ber-EP4 + cellules à fonctionnement commandé (FS)) et IL-2Ra + cellules (CD25).
Barbera-Guillem Emilio
Cli Oncology Inc.
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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