C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/62 (2006.01) C07K 14/435 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01)
Patent
CA 2239951
The present invention provides a method of screening for a compound that binds to a selected nucleic acid comprising contacting compound fluorescently labeled by a fluorescent protein with a cell having a plurality of copies of the nucleic acid in an array such that the nucleic acid can be directly detected when bound by fluorescently labeled compound; and directly detecting the location of fluorescence within the cell, fluorescence aggregated at the site of the nucleic acid array indicating a compound that binds to the selected nucleic acid. In particular compounds such a transcription factor can be screened. Reagents for such method are provided including a mammalian cell having a plurality of steroid receptor response elements in an array such that the response element can be directly detected when bound by fluorescently labeled steroid receptor and a chimeric protein comprising a fluorescent protein fused to a steroid receptor.
La présente invention concerne un procédé de recherche d'un composé qui se lie à un acide nucléique sélectionné, comprenant la mise en contact d'un composé, étiqueté de manière fluorescente par une protéine fluorescente, avec une cellule ayant plusieurs copies de l'acide nucléique, dans un arrangement tel que l'acide nucléique peut être détecté directement quand il est lié par le composé étiqueté de manière fluorescente. Le procédé selon l'invention permet aussi de détecter directement l'emplacement de la fluorescence à l'intérieur de la cellule. Si la fluorescence est agrégée à l'emplacement de l'arrangement d'acide nucléique, cela indique qu'un composé se lie à l'acide nucléique sélectionné. Dans des composés particuliers, on peut rechercher un tel facteur de transcription. L'invention concerne également des réactifs destinés à un tel procédé, dont une cellule de mammifère ayant un certain nombre d'éléments de réaction aux récepteurs stéroïdes dans un arrangement tel que l'élément de réaction peut être détecté directement quand il est lié par un récepteur stéroïde étiqueté de manière fluorescente et une protéine chimérique comprenant une protéine fluorescente fusionnée avec un récepteur stéroïde.
Hager Gordon L.
Htun Han
Depar Tment Of Health And Human Services The Government Of The United States Represented By The Secretary
Department Of Health And Human Services The Government Of The United States Of America Represented By Th
Gowling Lafleur Henderson Llp
Htun Han
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1614223