Method and device for detection of specific target cells in...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/24 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01) B01D 57/00 (2006.01) B03C 1/00 (2006.01) C12M 1/12 (2006.01) C12M 3/06 (2006.01) C12N 1/02 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/04 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01) H01F 1/00 (2006.01)

Patent

CA 2185128

The invention relates to a method and apparatus for detecting specific target cells in a simple and time-saving way, using paramagnetic particles, antibodies recognizing the Fe portions of target-cell associating antibodies and target-cell associating antibodies directed to specific antigen determinants in the target-cell membranes. Incubation of the cell suspension with detergent and/or second antibodies or antibody fragments, prelabeled or not with fluorescent agents, metallocolloids, radioisotopes, biotin complexes or certain enzymes allowing visualization, dramatically increase the specificity of the method. The method and apparatus described provides a solid support and permanent record which is easily viewed by microscopy, permits viewing and quantification of the whole specimen rather than small fractions thereof and allows the use of large specimen volumes to be analysed, the device may also be scanned automatically by conventional densitometric technology. The method and apparatus can be used for isolation of the target cells by magnetic field application, and a kit and apparatus for performing the method according to the invention is described.

Méthode et appareil permettant de dépister, selon une procédure simple et rapide, certaines cellules cibles au moyen de particules paramagnétiques, d'anticorps reconnaissant les portions Fc des anticorps s'associant aux cellules cibles et les anticorps s'associant aux cellules cibles dirigés contre des déterminants antigèniques spécifiques dans les membranes des cellules cibles. L'incubation de la suspension de cellules avec un détergent et/ou des anticorps secondaires ou des fragments d'anticorps, ayant ou non fait l'objet d'un prémarquage à l'aide d'agents fluorescents, de métaux colloïdaux, de radioisotopes, de complexes de biotine ou de certains enzymes permettant la visualisation, renforce considérablement la spécificité de cette méthode. La méthode et l'appareil décrits permettent de produire un support solide et une représentation permanente, aisément visualisable par microscopie, et d'assurer la visualisation et la quantification de la totalité de l'échantillon plutôt que de petites fractions de celui-ci. La méthode et l'appareil permettent, en outre, d'analyser d'importants volumes d'échantillons, et le dispositif se prétant également au dépistage automatique par une technique classique de densitométrie. L'appareil et la méthode peuvent être utilisés pour isoler les cellules cibles par application d'un champ magnétique, et l'invention prévoit un kit et un appareil permettant d'appliquer ladite méthode.

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