Method and reagent for the specific identification and...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2649154

The invention relates to a method for the identification and quantification of one or more biomolecules in a sample containing a mixture of substances, wherein said method comprises the steps of, a) providing a sample which contains one or more biomolecules, b) providing a reagent for the analysis of biomolecules according to Formula (I) (A-Y-PRG) wherein, A may be present or absent and when A is present, A is H or constitutes at least one functional group for the reversible, covalent or non-covalent binding to a support material, whereby Y is a group comprising at least one chelate function for metals, preferable low in isotopes, and whereby PRG is a reactive group for the selective binding of biomolecules to be analyzed, c) coupling the one or more biomolecules from step a) to the reagent of step b), d) selecting the one or more biomolecules labeled in step c) under the employment of a functional group for the reversible, covalent or non-covalent binding to a support material and removal of the one or more unbound biomolecules, wherein (d) optionally comprises releasing the bound biomolecules from the support material and the elution from the matrix; and f) detecting and identifying the one or more labeled biomolecules by means of Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry (ICP-MS), wherein f) optionally comprises cleaving the one or more biomolecules in said sample wherein, said cleaving may be performed (i) before coupling of the reagent PRG or (ii) after coupling.

L'invention concerne un procédé pour l'identification et la quantification d'une ou plusieurs biomolécules dans un échantillon contenant un mélange de substances, ledit procédé comprenant les étapes consistant à : a) obtenir un échantillon qui contient une ou plusieurs biomolécules ; b) obtenir un réactif pour l'analyse de biomolécules selon la formule (I) (A-Y-PRG) dans laquelle A peut être présent ou absent et, lorsqu'il est présent, A est H ou constitue au moins un groupe fonctionnel pour la liaison réversible covalente ou non covalente à une matière support, Y est un groupe comprenant au moins une fonction chélate pour les métaux, de préférence ayant une faible teneur en isotopes, et PRG est un groupe réactif pour la liaison sélective de biomolécules à analyser ; c) coupler ladite ou lesdites biomolécules provenant de l'étape a) au réactif de l'étape b) ; d) sélectionner ladite ou lesdites biomolécules marquées dans l'étape c) en employant un groupe fonctionnel pour la liaison réversible covalente ou non covalente à une matière support et en éliminant ladite ou lesdites biomolécules non liées, l'étape d) comprenant éventuellement la libération des biomolécules fixées de la matière support et l'élution de celles-ci de la matrice ; et f) détecter et identifier ladite ou lesdites biomolécules marquées au moyen de la spectrométrie de masse associée à une source à plasma à couplage inductif (ICP-MS), l'étape f) comprenant éventuellement le clivage de ladite ou desdites biomolécules dans ledit échantillon, ledit clivage pouvant être effectué (i) avant le couplage du réactif PRG ou (ii) après le couplage.

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