Method and system for preparing tissue samples for...

A - Human Necessities – 01 – N

Patent

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Details

A01N 1/00 (2006.01) A01N 1/02 (2006.01) F25D 31/00 (2006.01) F25D 25/00 (2006.01) G01N 1/42 (2006.01)

Patent

CA 2433356

Viable biological material is cryogenically preserved (cryopreservation) by immersing the material in a tank of cooling fluid, and circulating the cooling fluid past the material at a substantially constant predetermined velocity and temperature to freeze the material. The material may either be directly plunged into the cooling fluid without preparation, or chemically prepared prior to freezing. A method according to the present invention freezes the biologic material quickly enough to avoid the formation of ice crystals within cell structures (vitrification) and allows the samples to maintain anatomical structure and remain biochemically active after thaw. The temperature of the cooling fluid is preferably between -20 degrees centigrade and -30 degrees centigrade, which is warm enough to minimize the formation of stress fractures and other artefacts in cell membranes due to thermal changes. Cells frozen using a method according to the present invention have been shown to have a significantly less cellular and intercellular damage than cells frozen by other cryopreservation methods used for pathological and histological techniques. Because the present invention can freeze biological material such that the material is vitrified, biochemical activity within the cell is not lost after freezing and thus various embodiments of the present method may be employed in a system to prepare biological material for the newer techniques of cryopathology and immunohistochemistry in the areas of research and patient care.

L'invention concerne un matériau biologique viable conservé par cryogénie (cryoconservation) par immersion dudit matériau dans un réservoir contenant un fluide de refroidissement, puis par acheminement du fluide de refroidissement devant le matériau à une vitesse et à une température prédéterminées sensiblement constantes, de manière à congeler ledit matériau. Le matériau peut, soit être directement plongé dans le fluide de refroidissement sans préparation, soit préparé de manière chimique avant congélation. Un mode de réalisation décrit dans l'invention consiste à congeler le matériau biologique suffisamment rapidement pour éviter la formation de cristaux de glace à l'intérieur des structures cellulaires (vitrification) et permettre aux échantillons de conserver une structure anatomique et une activité biochimique après décongélation. La température du fluide de refroidissement est, de préférence, comprise entre 20 et 30 ·C, ce qui est une température suffisamment chaude pour réduire la formation de fractures de tension et d'autres artefacts provoqués par les changements de température dans des membranes cellulaires. Les cellules congelées selon le mode de réalisation décrit dans cette invention présentent une quantité d'avaries cellulaires et intercellulaires moins importante que les cellules congelées selon d'autres procédés de cryoconservation utilisés pour des techniques d'examens pathologiques et histologiques. Le matériau biologique étant congelé de telle manière qu'il est vitrifié, l'activité biochimique à l'intérieur des cellules n'est pas perdue après congélation; ainsi, divers modes de réalisation décrits dans cette invention peuvent être appliqués dans un système de préparation de matériaux biologiques pour des techniques de cryopathologie et d'immunohistochimie plus récentes dans des domaines tels que la recherche et les soins aux malades.

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