Method for analysing metabolites

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/58 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

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CA 2547755

Described is a method for analysing the metabolites of a biological sample which comprises quantitatively determining one or more metabolites in said sample in a way that said quantitative determination resolves isotopic mass differences within one metabolite, said method being characterized in that the sample comprises or is derived from a cell which has been maintained under conditions allowing the uptake of an isotopically labeled metabolizable compound so that the metabolites in said cell are saturated with the isotope with which said metabolizable compound is labeled. This method may further comprise, prior to quantitative determining the metabolites, combining the biological sample (i.e. the first biological sample) with a second biological sample in which the metabolites are not isotopically labeled or are isotopically labeled differently from the first biological sample; and determining in said biological samples the relative quantity of metabolites which differ by their isotopical label. Furthermore described is a set of isotopically labeled metabolites obtainable by applying this method, as well as kits facilitating the application of this method and corresponding uses.

La présente invention a trait à un procédé pour l'analyse de métabolites dans un échantillon biologique comprenant la détermination quantitative d'un ou de plusieurs métabolites dans ledit échantillon de sorte que ladite détermination quantitative réalise la solution des différences de masses isotopes au sein d'un métabolite, ledit procédé étant caractérisé en ce que l'échantillon comporte ou est dérivé d'une cellule qui a été maintenue dans des conditions permettant l'incorporation d'un composé métabolisable à marquage isotopique de sorte que les métabolites dans ladite cellule sont saturés avec l'isotope avec lequel ledit composé métabolisable est marqué. Le procédé peut également comprendre, préalablement à la détermination quantitative des métabolites, la combinaison de l'échantillon biologique (c'est à dire le premier échantillon biologique) avec un deuxième échantillon biologique dans lequel les métabolites n'ont pas été soumis à un marquage isotopique ou ont été soumis à un marquage isotopique différent du premier échantillon biologique ; et la détermination dans lesdits échantillons biologiques de la quantité relative de métabolites qui sont différents par leur marquage isotopique. L'invention a trait en outre à un ensemble de métabolites à marquage isotopique capables d'être obtenus par l'application de ce procédé, ainsi que des trousses facilitant l'application de ce procédé et des utilisations correspondantes.

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