Method for analyzing organelle-localized protein and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/62 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) G01N 33/48 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01)

Patent

CA 2474680

It is intended to provide a method of analyzing whether or not a test protein is localized in organelle characterized by comprising: (a) the step of transferring a fused peptide (a) containing a half peptide of an intein, a half peptide of a fluorescent protein and an organelle-targeting signal peptide into eucaryotic cells; (b) the step of transferring the test protein, which has been bonded to a fused peptide (b) containing the other half peptide of the above-described fluorescent protein and the other half peptide of the above-described intein, into eucaryotic cells; and (c) the step of detecting a fluorescent signal generated from the fluorescent protein, and materials (for example, the fused peptides and/or expression vectors thereof) to be used in this method.

L'invention concerne un procédé pour déterminer la présence ou l'absence d'une protéine test dans un organite, ce procédé étant caractérisé par les opérations suivantes : (a) transférer dans des cellules eucaryotes un peptide (a) lié par fusion contenant un demi-peptide d'intéine, un demi-peptide d'une protéine fluorescente et un peptide de signalisation de cible organite ; (b) transférer dans des cellules eucaryotes la protéine test qui aura été liée à un peptide (b) lié par fusion contenant l'autre moitié du peptide de la protéine fluorescente susmentionnée et l'autre moitié du peptide de l'intéine susmentionnée ; (c) détecter un signal fluorescent généré par la protéine fluorescente. La présente invention porte également sur des matières nécessaires à la réalisation de ce procédé (par exemple, les peptides liés par fusion et/ou leurs vecteurs d'expression).

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