C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
H
C07H 21/00 (2006.01) C07B 61/00 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2381761
A method for anchoring oligonucleotides containing multiple reaction sites to a substrate. The substrate can be glass, inorganic or organic polymer, and metal. The reactive group of the substrate can contain electrophilic C=C double bonds for a nucleophilic addition, or disulfide for disulfide exchange. The multiple reactive groups contained on the oligonucleotide primer can be, for example, aminoalkyl, sulfhydryl, and thiophosphate groups. The oligonucleotide primer may take the configuration of a hairpin having a loop containing multiple reactive sites. In particular, a method for attaching an oligonucleotide primer to a glass substrate is disclosed that comprises preparing a bromoacetamide derivatized silane glass surface on a glass substrate, and reacting the bromoacetamide derivatized silane glass surface with an oligonucleotide primer containing multiple thiophosphate groups to bind the oligonucleotide primer to the glass substrate. An oligonucleotide containing multiple reactive sites, as well as a probe and a kit containing the same are also disclosed.
La présente invention concerne un procédé d'ancrage d'oligonucléotides contenant des sites de réaction multiples à un substrat. Ce substrat peut être du verre, un polymère organique ou inorganique, ou du métal. Le groupe réactif du substrat peut contenir des liaisons doubles C=C électrophiles pour une addition nucléophile, ou du bisulfure pour l'échange bisulfure. Les groupes réactifs multiples contenus dans l'amorce oligonucléotidique peuvent être par exemple des groupes aminoalkyle, sulfhydryle, et thiophosphate. L'amorce oligonucléotidique peut présenter une structure en épingle à cheveux comportant une boucle qui contient des sites de réactions multiples. En particulier, cette invention concerne un procédé de fixation d'une amorce nucléotidique à un substrat en verre consistant d'abord à préparer une surface en verre de silane dérivé de bromoacétamide sur un substrat en verre, et à faire réagir ensuite la surface en verre de silane dérivé de bromoacétamide avec une amorce oligonucléotidique contenant des groupes triophosphate multiples afin de fixer l'amorce oligonucléotidique au substrat en verre. En outre, cette invention concerne un oligonucléotide contenant des sites de réactions multiples, ainsi qu'une sonde et un kit contenant ceux-ci.
Amersham Pharmacia Biotech Inc.
Fetherstonhaugh & Co.
Ge Healthcare Bio-Sciences Corp.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1654798