Method for chromogenic detection of two or more target...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)

Patent

CA 2734783

The present invention provides a method and kit for detection of two or more target molecules in a single tissue sample, such as for gene and protein dual detection in a single tissue sample. Methods comprise treating a tissue sample with a first binding moiety that specifically binds a first target molecule. Methods further comprise treating the tissue sample with a solution containing a soluble electron-rich aromatic compound prior to or concomitantly with contacting the tissue sample with a hapten-labeled binding moiety and detecting a second target molecule. In one example, the first target molecule is a protein and the second is a nucleic acid sequence, the first target molecule being detected by immunohistochemistry and the second by in situ hybridization. The disclosed method reduces background due to non-specific binding of the hapten-labeled specific binding moiety to an insoluble electron rich compound deposited near the first target molecule.

La présente invention concerne un procédé et une trousse pour la détection dau moins deux molécules cibles dans un unique échantillon tissulaire, par exemple pour une double détection de gènes et de protéines dans un unique échantillon tissulaire. Les procédés comprennent le traitement dun échantillon tissulaire avec un premier groupe fonctionnel de liaison se liant de manière spécifique à une première molécule cible. Les procédés comprennent également le traitement de léchantillon tissulaire avec une solution contenant un composé aromatique soluble riche en électrons avant ou pendant la mise en contact de léchantillon tissulaire avec un groupe fonctionnel de liaison marqué dun haptène et la détection dune seconde molécule cible. Selon un exemple, la première molécule cible est une protéine et la seconde molécule cible est une séquence dacides nucléiques, la première molécule cible étant détectée par limmunohistochimie et la seconde par lhybridation in situ. Le procédé selon linvention réduit larrière-plan grâce à une liaison non spécifique du groupe fonctionnel de liaison spécifique marqué dun haptène à un composé riche en électrons déposé à proximité de la première molécule cible.

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