C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12N 5/08 (2006.01)
Patent
CA 2174925
A method of adding extracellular matrix components to the stationary phase of the matrix for bipolar adhesion of hepatocytes enables these substances to be concentrated and bonded to a defined base matrix composed of a simple base matrix (e.g: type I collagen). One advantage, for example, when fibronectin is added, is to provide a complete serum-free culture of liver cells while maintaining normal morphology and function; as a result conventional culture media previously unsuited to serum-free culture of liver cells are now also suitable for relatively long-term serum-free culture. Furthermore, reproducibility of trial results and mechanical stability are substantially improved over the conventional form of matrix layering. The method is applied using a specially adapted kit. Other matrix components can also be added to the matrix by this method, and thus concentration and bonding can be effected within the fibrillary matrix skeleton after the base matrix has gelled.
L'invention concerne un procédé d'addition de constituants matriciels extracellulaires à la phase stationnaire de la matrice prévue pour effectuer l'adhérence bipolaire d'hépatocytes, qui permet de concentrer et de lier ces substances à une matrice de base définie, composée d'une matrice de base simple (par ex. du collagène de type I). Ce procédé présente l'avantage, par ex. en cas d'adjonction de fibronectine, de permettre la culture entièrement exempte de sérum de cellules hépatiques, tout en conservant une morphologie et une fonction normales, de manière à ce que des milieux de culture classiques qui ne se prêtaient pas jusqu'à maintenant à des cultures exemptes de sérum de cellules hépatiques, s'utilisent également pour la culture exempte de sérum à relativement long terme. De plus, la reproductibilité des résultats obtenus et la stabilité mécanique sont sensiblement améliorées comparativement à la forme classique du mode de revêtement de la matrice. Ce procédé est mis en oeuvre à l'aide d'une trousse appropriée. Ce procédé permet également d'ajouter d'autres constituants matriciels à la matrice et de parvenir à une concentration et à une liaison à l'intérieur du squelette matriciel fibrillaire après gélification de la matrice de base.
Bader Augustinus
Dennison Associates
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2089978