Method for detecting metastasis of gi cancer

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/527 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/573 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)

Patent

CA 2752668

The present invention provides a novel method for diagnosing, monitoring, prognosing and staging Lymph Node (LN) status in colorectal cancer (CRC)that is more sensitive and accurate than conventional detection technologies such as histopathology. The Guanylyl Cyclase C (GCC) gene is specifically expressed in apical epithelial cells of the GI tract from the duodenum to the rectum and the detection of GCC mRNA in LN s is indicative of the presence of metastases. Quantitative RT-PCR (RT-qPCR) detection of GCC mRNA to identify the presence of colorectal cancer (CRC) cells in LN s has the potential to aid in CRC staging. When used in combination with glucuronidase B (GUSB), accurate quantification of GCC can be achieved with less than a 2-fold variation between intact and highly degraded RNA specimens. The invention also relates to a newly designed GCC/GUSB assay that uses relative quantification having improved prognostic value for time to recurrence and relapse-free survival in Stage I or II colon cancer patients. The GCC/GUSB assay also improves the statistical power of prognosis stratification for relative risk of recurrence and relapse-free survival.

La présente invention porte sur un nouveau procédé de diagnostic, de surveillance, de pronostic et de stadification de l'état d'un ganglion lymphatique (LN) dans un cancer colorectal (CRC) qui est plus sensible et précis que des technologies classiques de détection telles que l'histopathologie. Le gène de la Guanylyl Cyclase C (GCC) est spécifiquement exprimé dans les cellules épithéliales apicales du tractus gastro-intestinal du duodénum au rectum et la détection d'ARNm de GCC dans des LN est une indication de la présence de métastases. La détection quantitative par RT-PCR (RT-qPCR) d'ARNm de GCC pour identifier la présence de cellules d'un cancer colorectal (CRC) dans des LN offre la possibilité d'aider à la stadification du CRC. Lorsqu'elle est utilisée en association avec la glucuronidase B (GUSB), la quantification précise de la GCC peut être réalisée avec une variation inférieure à un facteur 2 entre des échantillons d'ARN intacts et des échantillons d'ARN hautement dégradés. L'invention porte également sur un dosage de GCC/GUSB nouvellement conçu qui utilise une quantification relative ayant une valeur pronostique améliorée pour le temps avant récidive et la survie sans rechute chez des patients souffrant d'un cancer du côlon de stade I ou II. Le dosage de GCC/GUSB améliore également l'efficacité statistique de la stadification pronostique pour le risque relatif de récidive et la survie sans rechute.

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