G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/543 (2006.01) C07K 17/00 (2006.01)
Patent
CA 2756109
Disclosed are: a method for detecting a substance in a biological sample; a carrier for use in the method; and a kit. The method comprises the following steps 1) to 4): 1) providing a carrier having a biotin-binding protein bound thereto, and a biotinylated protein comprising biotin and a protein capable of binding specifically to a substance to be detected and bound to biotin; 2) binding the biotinylated protein to the carrier provided in step 1) to produce a carrier having the biotinylated protein bound thereto; 3) adding the component (a) shown below and either one of the components (b-i) and (b-ii) shown below to the carrier having the biotinylated protein bound thereto prepared in step 2) and mixing the components and the carrier together; and 4) detecting the substance which has been bound specifically to the biotinylated protein: (a) a biological sample; (b-i) both a cell disruption extract which is prepared from a cell homogeneous to a host cell used for the expression of the biotin-binding protein and so on in step 1) and a biotin-binding protein; and (b-ii) a cell disruption extract prepared from a cell which is homogeneous to a host cell used for the expression of the biotin-binding protein and so on in step 1) and which has been so modified by a genetic engineering technology as to express the biotin-binding protein.
L'invention concerne : un procédé de détection d'une substance dans un échantillon biologique ; un support destiné à être utilisé dans le procédé ; et un kit. Le procédé comprend les étapes 1) à 4) suivantes : 1) la mise à disposition d'un support auquel est reliée une protéine de liaison à la biotine, et d'une protéine biotinylée comprenant de la biotine et une protéine capable de se lier spécifiquement à une substance à détecter et liée à la biotine ; 2) la liaison de la protéine biotinylée au support mis à disposition à l'étape 1) pour produire un support auquel la protéine biotinylée est liée ; 3) l'ajout du composant (a) représenté ci-dessous et du composant (b-i) ou (b-ii) représenté ci-dessous au support auquel est liée la protéine biotinylée préparé à l'étape 2) et le mélange des composants et du support ensemble ; et 4) la détection de la substance qui a été liée spécifiquement à la protéine biotinylée : (a) un échantillon biologique ; (b-i) à la fois un extrait de désintégration cellulaire qui est préparé à partir d'une cellule homogène à une cellule hôte utilisée pour l'expression de la protéine de liaison à la biotine et ainsi de suite à l'étape 1) et une protéine de liaison à la biotine ; et (b-ii) un extrait de désintégration cellulaire préparé à partir d'une cellule qui est homogène à une cellule hôte utilisée pour l'expression de la protéine de liaison à la biotine et ainsi de suite à l'étape 1) et qui a été modifiée par génie génétique pour exprimer la protéine de liaison à la biotine.
Kondo Kazuhiro
Oka Naomi
Takakura Yoshimitsu
Japan Tobacco Inc.
Robic
Virus Ikagaku Kenkyusho Inc.
LandOfFree
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