Method for determination of gene function

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2403259

The present method is useful for the identification of genes, ORF's and other nucleic acid molecules which are essential for the expression of a specific phenotype in microorganisms. The method employs in vitro transposition in conjunction with an chromosomal integration vector containing a specific gene or genetic element whose function is unknown. Subsequent transformation of a recombination proficient host with the vector and growth first under non- integrating conditions and then under integrating conditions, followed by a selection screen for either single or double crossover events results in transformants that may be subjected to phenotypic screens to determine gene function.

L'invention concerne un procédé servant à identifier des gènes, des ORF et d'autres molécules d'acide nucléique essentiels pour l'expression d'un phénotype spécifique dans des micro-organismes. Le procédé utilise la transposition in vitro conjointement avec un vecteur d'intégration chromosomique contenant un gène spécifique ou un élément génétique dont la fonction est inconnu. La transformation subséquente d'un hôte efficace de recombinaison avec le vecteur et la croissance en premier lieu dans des conditions de non intégration, puis dans des conditions d'intégration, suivies d'un crible de sélection pour des événements à croisement simple ou double, produisent des transformants que l'on peut soumettre à des cribles phénotypiques pour déterminer la fonction génique.

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