C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2348548
The invention relates to methods for the base sequencing of deoxyribonucleic acid or ribonucleic acid, comprising the following steps: (1) immobilising DNA or RNA single strands on a planar support; (2) focussing a laser beam on a single, immobilised single strand; (3) producing a DNA or RNA complementary strand of said immobilised, focussed single strand by adding a solution containing (i) at least one luminescence-tagged nucleotide of the bases adenine, cytosine, guanine and thymine for producing a DNA or RNA complementary strand or at least one luminescence-tagged nucleotide of the bases adenine, cytosine, guanine and uracil for producing an RNA complementary strand and (ii) a polymerase, each insertion of a luminescence-tagged nucleotide into the complementary strand being detected with a single-molecule detector and the luminescence signal of the previous luminescence-tagged nucleotide being deleted before the next luminescence-tagged nucleotide is inserted.
L'invention concerne des procédés pour la détermination de séquences de base d'acide désoxyribonucléique ou d'acide ribonucléique, procédés qui comportent les étapes suivantes: (1) immobilisation de brins simples d'ADN ou d'ARN sur un support plan ; (2) focalisation d'un rayon laser sur un brin simple unique immobilisé; (3) constitution d'un brin d'ADN ou d'ARN complémentaire du brin simple immobilisé et focalisé par addition d'une solution contenant (i) au moins un nucléotide marqué par luminescence des bases adénine, cytosine, guanine et thymine pour la constitution d'un brin complémentaire d'ADN ou au moins un nucléotide marqué par luminescence des bases adénine, cytosine, guanine et uracile pour la constitution d'un brin complémentaire d'ARN et (ii) une polymérase. Dans les procédés selon l'invention, on détecte chaque insertion d'un nucléotide marqué par luminescence dans le brin complémentaire avec un détecteur de molécule individuelle et on efface le signal de luminescence du nucléotide marqué par luminescence précédent avant d'insérer le nucléotide marqué par luminescence suivant.
Fetherstonhaugh & Co.
Molecular Machines & Industries Gmbh
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1619892