Method for expressing inducible rnai in cells, nucleic acid...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/85 (2006.01) A61K 31/713 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2506763

The invention concerns a method for expressing RNAi in cells comprising: (i) introducing in cells a nucleic acid molecule including the RNAi sense and antisense sequences placed under the control of a single transcription promoter, said sense and antisense sequences being separated by a DNA sequence including a sequence for arrest of said transcription, said DNA sequence being framed at each of its ends by a lox site, (ii) contacting the lox sites with Cre, to obtain by site-specific recombination elimination of the DNA sequence and of the transcription arrest sequence such that said sense and antisense sequences are no longer separated by the remaining lox sequence thus enabling the transcription of the RNAi integrally with the residual lox sequence as loop.

La présente invention a pour objet une méthoded'expression d'ARNi dans des cellules comprenant : (i) l'introduction dans des cellules d'une molécule d'acide nucléique comprenant les séquences sens et antisens de l'ARNi placées sous le contrôle d'un promoteur de transcription unique, lesdites séquences sens et antisens étant séparées par une séquence d'ADN comprenant une séquence d'arrêt de ladite transcription, ladite séquence d'ADN étant encadrée à chacune de ses extrémités par un site lox, (ii) la mise en contact des sites lox avec Cre, pour obtenir par recombinaison site-spécifique l'élimination de la séquence d'ADN et de la séquence d'arrêt de la transcription de façon à ce que lesdites séquences sens et antisens ne soient plus séparées que par la séquence lox restante et ainsi permettre la transcription de l'ARNi dans son intégralité avec la séquence lox résiduelle comme boucle.

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