C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/50 (2006.01) C12Q 1/37 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)
Patent
CA 2208515
The present invention describes methods for screening or selecting novel proteolytic enzymes. These enzymatic functions can be selected from isolated chromosomal DNA libraries or from pools of mutagenized DNA encoding a proteolytic function. In particular, the selection method of the present invention, a phage gene is chosen that encodes a gene product necessary for the production of a phage. The phage carrying the modified gene is introduced into a host. Also, DNA libraries present within a cloning vector are introduced into host cells. The host cells are grown under conditions where the introduced libraries are expressed in the host cells. The presence of an enzymatic function capable of cleaving the target peptide is identified on the basis of production of infective phage.
Cette invention décrit des techniques de recherche ou de sélection de nouvelles enzymes protéolytiques. Il est possible de sélectionner ces fonctions enzymatiques à partir de bibliothèques d'ADN chromosomique isolé ou de groupes d'ADN mutagénisé codant pour une fonction protéolytique. Dans la technique de sélection utilisée dans le cadre de cette invention, notamment, on sélectionne un gène de phage codant pour un produit génique nécessaire à la production d'un phage. On introduit ce dernier, porteur du gène modifié, dans un hôte ainsi que des bibliothèques d'ADN présentes dans un véhicule de clonage dans des cellules hôtes. La croissance de ces dernières s'effectue dans des situations où les bibliothèques introduites sont exprimées dans les cellules hôtes. C'est à partir de la production d'un phage infectant que l'on met en évidence la présence d'une fonction enzymatique capable de diviser la cible peptidique.
Davis Claude Geoffrey
Guay Gordon G.
Catalytic Antibodies Inc.
Gowling Lafleur Henderson Llp
LandOfFree
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