Method for in vivo identification of intracellular epitopes

Details Method for in vivo identification of intracellular epitopes Method for in vivo identification of intracellular epitopes

G - Physics

01

N

G01N 33/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2426744

A method is described for the in vivo identification of epitopes of an intracellular antigen comprising the steps of: a) co-transforming of cells by a first vector including the nucleotide sequence encoding for the region of an antibody able to recognise and bind the intracellular antigen and by a second vector comprising the nucleotide sequence encoding for a peptide; b) growing co-transformed cells in such an environment that only cells wherein the antibody region and peptide recognise and interact each other are able to replicate and/or be recognised because: the antibody region able to recognise and bind the intracellular antigen is associated with a first molecule; the peptide is associated with a second molecule; the interaction of the first with the second molecule generates a selectable phenotype and/or recognisable signal; and the interaction of the first with the second molecule occurs only when the antibody region and peptide recognise and interact each other; c) selecting the b) cells and identify the peptide as epitope.

L'invention se rapporte à un procédé permettant une identification in vivo d'épitopes d'un antigène intracellulaire. Ledit procédé consiste à a) co-transformer des cellules par un premier vecteur comprenant la séquence nucléotidique codant pour la région d'un anticorps capable de reconnaître l'antigène intracellulaire et de se lier à celui-ci et par un second vecteur comportant la séquence nucléotidique codant pour un peptide; b) faire croître les cellules co-transformées dans un environnement tel que seules les cellules dans lesquelles la région de l'anticorps et le peptide se reconnaissent et interagissent l'un avec l'autre sont capables de se répliquer et/ou d'être reconnus du fait que la région de l'anticorps capable de reconnaître l'antigène intracellulaire et de se lier à ce dernier est associée à une première molécule; le peptide est associé à une seconde molécule; l'interaction de la première molécule avec la seconde molécule génère un phénotype sélectionnable et/ou un signal susceptible d'être reconnu; et l'interaction de la première molécule avec la seconde molécule se produit uniquement lorsque la région de l'anticorps et le peptide se reconnaissent et interagissent l'un avec l'autre; c) sélectionner les cellules de l'étape b) et identifier le peptide en tant qu'épitope.

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