G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/557 (2006.01) C07C 229/14 (2006.01) C07K 5/068 (2006.01) G01N 33/542 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01)
Patent
CA 2489389
The invention concerns a method for isolating an allosteric effector of a receptor, by determining the variation of the dissociation kinetics of the complex formed between said receptor and one of its ligands in the presence of said allosteric effector, as compared to the kinetics dissociation formed between said receptor and said ligand, in the absence of said effector, and/or the amplitude of the linkage formed between said receptor and one of its ligands in the presence of said allosteric effector, as compared to the amplitude of the linkage formed between said receptor and said ligand in the absence of said effector, said receptor and said ligand being involved in at least one biological response in suitable physiological conditions, and the allosteric effector being capable of modulating at least one of the responses, said receptor being marked by at least one fluorescent protein, said ligand being marked by a marker consisting either of a molecule capable of absorbing light emitted by the fluorescent protein, or by a fluorescent substance, said steps for determining kinetics dissociation variation and amplitude variation being carried out by fluorescence energy transfer.
L'invention concerne un procédé de mise en évidence d'un effecteur allostérique d'un récepteur, par détermination de la variation de la cinétique de dissociation du complexe forme entre le susdit récepteur et Fun de ses ligands en présence dudit 10 effecteur allostérique, par rapport à la cinétique de dissociation du complexe forme entre ledit récepteur et ledit ligand, en l'absence dudit effecteur, et/ou de l'amplitude de la liaison formée entre le susdit récepteur et Fun de ses ligands en présence dudit effecteur allostérique, par rapport à d~amplitude de la liaison formée entre ledit récepteur et ledit ligand, en l'absence dudit effecteur, 15 ledit récepteur et ledit ligand étant impliques dans au moins une réponse biologique dans des conditions physiologiques appropriées, et l'effecteur allostérique étant capable de moduler au moins Tune des réponses, ledit récepteur étant marque par une protéine fluorescente, ledit ligand étant marque par un marqueur constitue soit par une molécule 20 susceptible d'absorber la lumière émise par la protéine fluorescente, soit par une substance fluorescente, Lesdites déterminations de variation de, cinétique de dissociation et de variation d'amplitude étant effectuée par transfert d'énergie de fluorescence.
Bourguignon Jean-Jacques
Galzi Jean-Luc
Hibert Marcel
Maillet Emeline
Centre National de La Recherche Scientifique
Goudreau Gage Dubuc
Universite Louis Pasteur de Strasbourg
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1635033