C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/13 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01) C07K 1/00 (2006.01) C07K 14/52 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/725 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C12N 1/11 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01) C40B 30/00 (2006.01) C40B 40/02 (2006.01) C40B 40/10 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2602028
Polypeptides with desirable biophysical properties such as solubility, stability, high expression, monomericity, binding specificity or non- aggregation, including monomeric human VHs and VLs, are identified using a high throughput method for screening polypeptides, comprising the steps of obtaining a phage display library, allowing infection of a bacterial lawn by the library phage, and identifying phage which form larger than average plaques on the bacterial lawn. Sequences of monomeric human VHs and VLs are identified, which may be useful for immunotherapy or as diagnostic agents. Multimer complexes of human VHs and VLs are also identified. The VHs and VLs identified may be used to create further libraries for identifying additional polypeptides. Further, the VHs and VLs may be subjected to DNA shuffling to select for improved biophysical properties.
L~invention concerne des polypeptides ayant des propriétés biophysiques souhaitables telles qu~une solubilité, une stabilité, une haute expression, un caractère monomère, une spécificité de liaison ou une non agrégation, notamment des VH et des VL humains monomères, qui sont identifiés en utilisant un procédé de criblage des polypeptides à haut rendement, comprenant les étapes d~acquisition d~une banque d~expression phagique, en permettant l~infection d~un tapis bactérien par le phage de la banque, et d~identification du phage qui forme des plaques supérieures à la moyenne sur le tapis bactérien. Des séquences de VH et de VL humains monomères sont identifiées, lesquelles peuvent être utiles pour l~immunothérapie ou en tant qu~agents de diagnostic. Des complexes multimères de VH et de VL humains sont également identifiés. Les VH et les VL identifiés peuvent être utilisés pour créer d~autres banques pour identifier des polypeptides supplémentaires. De plus, les VH et les VL peuvent être soumis à un réarrangement de l~ADN pour sélectionner des propriétés biophysiques améliorées.
Cassan Maclean
National Research Council Of Canada
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1525595