Method for large scale mutagenesis in crop plants

Details Method for large scale mutagenesis in crop plants Method for large scale mutagenesis in crop plants

A - Human Necessities

01

H

A01H 1/04 (2006.01) A01H 1/06 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/01 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01)

Patent

CA 2303425

The present invention enables the rapid and large-scale production of mutants in crop plants. This is accomplished by utilizing a miniature plant which can be crossed with a commercial plant of the same species. Mutations are induced in the miniature cultivar, and the mutants subsequently identified in the resulting mutant plant population. Mutant genes of interest can be introgressed into a commercial cultivar by crossing selected mutant miniature plants with the commercial cultivar. Reverse genetics can be undertaken using a plant population of the miniature crop which contains random T-DNA or transposon insertion events and screening this population for insertions into genes of interest. Likewise, the miniature plant population is transformed with a DNA construct comprised of a promoter-less screenable marker gene within a mobile DNA. The mutants derived from this construct are rapidly screened for expression of the screenable marker gene and the promoter operably linked to the screenable marker gene in these transformants is cloned.

La présente invention permet la production rapide et à grande échelle de mutants dans des plantes de culture, opération qui repose sur l'utilisation d'une plante miniature pouvant être croisée avec une plante commerciale de même espèce. Les mutations sont induites dans le cultivar miniature, puis les mutants sont identifiés parmi la population de plantes mutantes obtenue. Les gènes mutants étudiés peuvent faire l'objet d'une introgression dans un cultivar commercial par croisement des plantes mutantes miniatures sélectionnées avec le cultivar commercial. On peut procéder à une analyse génétique inverse en utilisant une population de plantes issue de la culture miniature qui contient des événements d'insertion transposon ou ADN-T aléatoire et en analysant cette population en vue d'une insertion dans les gènes étudiés. De la même façon, la population de plantes miniatures est transformée à l'aide d'un produit de recombinaison d'ADN constitué d'un gène marqueur criblable sans promoteur à l'intérieur d'un ADN mobile. Les mutants dérivés de ce produit de recombinaison sont rapidement analysés en vue de l'expression du gène marqueur criblable et le promoteur fonctionnellement lié au gène marqueur criblable dans ces transformants est cloné.

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