Method for obtaining immunoglobulin encoding nucleic acid

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01)

Patent

CA 2751669

The current invention is directed to a method for obtaining a nucleic acid encoding an immunoglobulin variable domain from a single cell comprising the following steps: - performing a first polymerase chain reaction with three to six 5'-primer and one 3'-primer, performing with the product of the first polymerase chain reaction a second polymerase chain reaction with thirteen to sixteen 5'-primer and one 3'-primer, whereby the distance of the binding locations of the primer employed in the second polymerase chain reaction is reduced compared to the first polymerase chain reaction.

La présente invention porte sur un procédé d'obtention d'un acide nucléique codant pour un domaine variable d'immunoglobuline, à partir d'une seule cellule, qui consiste : - à effectuer une première réaction en chaîne par polymérase avec trois à six amorces en 5' et une amorce en 3', à effectuer, avec le produit de la première réaction en chaîne par polymérase, une seconde réaction en chaîne par polymérase avec treize à seize amorces en 5' et une amorce en 3', ce par quoi la distance des sites de liaison de l'amorce employée dans la seconde réaction en chaîne par polymérase est réduite par rapport à la première réaction en chaîne par polymérase.

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