Method for preparing orphan receptor ligands

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/11 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C07K 14/705 (2006.01) C07K 14/715 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/01 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01)

Patent

CA 2169190

Methods for obtaining cells that produce a ligand for an orphan receptor and methods for preparing polynucleotide molecules that encode ligands for orphan receptors are disclosed. The methods utilize growth factor-dependent parent cells that are transfected with a DNA construct encoding an orphan receptor. The transfected cells are exposed to mutagenizing conditions, and the mutagenized cells are cultured under conditions in which cell survival is dependent upon autocrine growth factor production. Progeny cells are recovered and screened to identify those that produce a ligand for the orphan receptor. Polynucleotide molecules encoding the ligand can be prepared from the identified cells.

Procédés d'obtention de cellules qui produisent un ligand destiné à un récepteur orphelin, et procédés de préparation de molécules de polynucléotides qui codent les ligands des récepteurs orphelins. Les procédés utilisent des cellules mères dépendant d'un facteur de croissance qui sont transfectées avec une construction d'ADN codant un récepteur orphelin. Les cellules transfectées sont exposées à des conditions mutagènes, et les cellules mutagénisées sont cultivées dans des conditions dans lesquelles la survie des cellules dépend de la production du facteur de croissance autocrine. Les cellules de la descendance sont récupérées et triées pour identifier celles qui produisent un ligand pour le récepteur orphelin. Des molécules de polynucléotides codant le ligand peuvent être préparées à partir des cellules identifiées.

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