Method for preparing water-soluble cross-linked conjugates

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 33/531 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/548 (2006.01)

Patent

CA 2336564

The preparation of new water-soluble cross-linked conjugates and cross-linked conjugate complexes improves the detection ability of immunochemical assays, including lateral flow devices, and relies on a "salting-out" process in which a reversible precipitate is formed at lyotropic salt concentrations greater than 1 M and coincides with a cross-linking of the backbone of the water- soluble intermediate conjugate. The backbone, which consists of polysaccharides, including dextrans, is linked to a signal component, such as a dye, that produces a colour, via a bifunctional linker component, such as epichlorohydrin or divinyl sulfone, and optionally through a protein spacer component such as ovalbumin (OA) or bovine serum albumin (BSA). The cross- linking of the dextrans occurs via the linker component, during the "salting- out" process to give, in the presence of suitable targets such as antibodies or antigens, water-soluble cross-linked conjugates and cross-linked conjugate complexes.

L'invention se rapporte à la préparation de nouveaux conjugués réticulés, solubles dans l'eau et de complexes de conjugués réticulés, qui permettent d'accroître la capacité de détection de dispositifs d'analyse immunochimique, et notamment de dispositifs à flux latéraux. La préparation de ces conjugués repose sur un processus de "relargage" dans lequel un précipité réversible est formé à des concentrations salines lyotropiques supérieures à 1 M, ledit précipité coïncidant avec une réticulation de la charpente du conjugué intermédiaire soluble dans l'eau. Cette charpente, qui est composée de polysaccharides, en particulier de dextranes, est liée à un autre composant indicateur, tel qu'une teinture, qui produit une couleur, par l'intermédiaire d'un composant de liaison bifonctionnel, tel qu'une sulfone d'épichlorhydrine ou de vinyle, et éventuellement par l'intermédiaire d'un composant écarteur protéique tel que l'ovalbumine (OA) ou l'albumine sérique bovine (BSA). La réticulation des dextranes qui se produit par l'intermédiaire du composant de liaison, au cours du processus de "relargage", sert à produire, en présence de cibles adaptées telles que des anticorps ou des antigènes, des conjugués réticulés solubles dans l'eau et des complexes de conjugués réticulés.

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