C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/02 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) C12Q 1/02 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2217816
Methods of obtaining enriched populations of osteoclast precursor cells which can be released from tissue culture dishes and used for biochemical studies are described. Osteoblastic cells and bone marrow cells are co-cultured. Next a .alpha.v.beta.3 receptor ligand, such as echistatin is used for cell detachment. The result is a 75-95 % pure enriched population of tartrate resistant acid phosphatase (TRAP+) cells, in high yields (2-3 X 106 cells per experiment) can be obtained. These cells are mostly mononucleated and based on their characteristics are considered to be pre-fusion osteoclasts (pOC cells). The precursor osteoclasts can be reseeded onto osteoblasts to obtain an enriched population of mature, multinucleated osteoclast cells.
Procédé d'obtention de populations enrichies de cellules précurseurs d'ostéoclastes qui peuvent être prélevées dans des boîtes de Petri et utilisées pour des études biochimiques. Des cellules ostéoblastiques et des cellules de moelle osseuse sont cultivées ensemble. Ensuite, un ligand de récepteur .alpha.¿v?.beta.¿3?, par exemple de l'échistatine, est utilisé pour le détachement des cellules. On obtient une population enrichie, d'une concentration de 75 à 95 % de cellules de phosphatase acide pures résistantes au tartrate (TRAP?+¿), avec de hauts rendements (2-3 X 10?6¿ cellules par expérience). Ces cellules sont pour la plupart mononuclées et au vu de leurs caractéristiques, on les considère comme des ostéoclastes avant fusion (pOC). On peut réensemencer les ostéoblastes avec des ostéoclastes précurseurs pour obtenir une population d'ostéoclastes matures, multinuclés.
Rodan Gideon A.
Rodan Sevgi B.
Wesolowski Gregg
Merck & Co. Inc.
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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