Method for producing a recombinant polypeptide

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/85 (2006.01) C07K 14/505 (2006.01) C12N 15/90 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)

Patent

CA 2468832

The invention relates to a method for producing a transformed eukaryotic host cell which expresses a recombinant polypeptide of interest which method comprises introducing into a eukaryotic host cell: (a) a first polynucleotide vector which comprises (i) a first nucleotide sequence which encodes a recombinant polypeptide of interest; and (ii) a second nucleotide sequence encoding a selectable marker, which second nucleotide sequence is amplified when the host cell is contacted with a selection agent; and (b) a second polynucleotide vector having essentially the same nucleotide sequence as the first polynucleotide vector except that the second nucleotide sequence is replaced with a third nucleotide sequence which encodes a different selectable marker; the first polynucleotide vector and second polynucleotide vector being stably integrated into the genome of the host cell.

L'invention se rapporte à un procédé de production d'une cellule hôte eucaryote transformée exprimant un polypeptide recombinant d'intérêt. Ledit procédé consiste à introduire dans une cellule hôte eucaryote : (a) un premier vecteur polynucléotidique comprenant (i) une première séquence nucléotidique codant un polypeptide recombinant d'intérêt, et (ii) une seconde séquence nucléotidique codant un marqueur sélectionnable, ladite seconde séquence nucléotidique étant amplifiée lorsque la cellule hôte est mise en contact avec un agent de sélection ; et (b) un second vecteur polynucléotidique présentant essentiellement la même séquence nucléotidique que le premier vecteur polynucléotidique, mis à part que la seconde séquence nucléotidique est remplacée par une troisième séquence nucléotidique codant un marqueur sélectionnable différent ; les premier et second vecteurs polynucléotidiques étant intégrés de manière stable dans le génome de la cellule hôte.

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