C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/87 (2006.01) A01K 67/027 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)
Patent
CA 2334382
The present invention provides a method for producing cloned cows by employing in vitro maturation of oocyte and nuclear transfer techniques. The method for producing cloned cows of the invention comprises the steps of: preparing donor somatic cells lines collected from cow; maturing oocytes collected from ovary in vitro; removing the cumulus cells surrounding the oocytes; cutting a portion of zona pellucida of the matured oocytes to make a slit, and squeezing out a portion of cytoplasm including the first polar body through the slit to give enucleated recipient oocytes; transferring a nucleus to the recipient oocyte by injection of the donor cells to the enucleated recipient oocytes, followed by the subseuent electrofusion and activation of the electrofused cells to give embryos; postactivating and culturing the embryos in vitro; and, transferring the cultured embryos into surrogate cows to produce cloned calves. The cloned cows can be employed to produce pharmaceuticals or organs, which facilitates their universal uses in medical and livestock industry, and scientific studies as well.
La présente invention se rapporte à un procédé de production de vaches clonées consistant en une maturation in vitro d'ovocytes et à des techniques de transfert nucléaire. Ledit procédé de production de vaches clonées consiste à préparer des lignées cellulaires somatiques donneuses prélevées sur une vache; à permettre la maturation des ovocytes prélevés dans les ovaires in vitro; à supprimer les cellules agglomérées entourant les ovocytes; à découper une partie de la membrane pellucide des ovocytes à maturation de manière à former une fente, et à faire sortir par compression une partie du cytoplasme contenant le premier corps polaire par la fente de manière à produire des ovocytes receveurs énucléés; à transférer un noyau dans l'ovocyte receveur par injection de cellules donneuses dans les ovocytes receveurs énucléés, puis à effectuer une électrofusion suivie d'une activation sur les cellules ayant subi l'électrofusion de manière à obtenir des embryons; à post-activer et à faire croître les embryons in vitro; et à transférer les embryons de culture dans des vaches substituts de manière à produire des vaches clonées. Ces vaches clonées peuvent servir à la fabrication de produits pharmaceutiques ou d'organes, ce qui permet leur utilisation universelle dans l'industrie médicale et l'industrie des bestiaux, ainsi qu'à des fins d'études scientifiques.
Cho Jong-Ki
Hwang Woo-Suk
Kim Ki-Yon
Kim Sung-Ki
Lee Byeong-Chun
Cassan Maclean
Hwang Woo-Suk
Seoul National University Industry Foundation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1728525