Method for producing phage display vectors

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/70 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/13 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)

Patent

CA 2231045

The present invention consists in a method for producing a phage display vector which includes causing or allowing recombination between (i) a first vector which includes a sequence encoding a first polypeptide chain of a specific binding pair member; and (ii) a second phage vector which includes a sequence encoding cre-recombinase operatively linked to a control sequence which allows expression of the Cre recombinase and a sequence encoding a second polypeptide chain of a specific binding pair member; wherein the recombination event gives rise to a recombinant phage vector in which expression of the Cre recombinase is substantially inhibited. The present invention also consists in a phage vector which includes a nucleic acid sequence encoding a promoter sequence, a first recombination site downstream and adjacent to the promoter sequence and an open reading frame for cre- recombinase positioned downstream and adjacent to the recombination site such that the promoter drives expression of the Cre recombinase.

La présente invention concerne un procédé de production d'un phage vecteur de présentation qui consiste à provoquer ou à permettre la recombinaison entre (i) un premier vecteur qui inclut une séquence codant une première chaîne polypeptidique d'un élément spécifique d'une paire de liaison, et (ii) un second phage vecteur qui inclut une séquence codant une cre recombinase fonctionnellement liée à une séquence témoin qui permet l'expression de la Cre recombinase et une séquence codant une seconde chaîne polypeptidique d'un élément spécifique d'une paire de liaison, l'événement de recombinaison engendrant un phage vecteur de recombinaison dans lequel l'expression de la Cre recombinase est sensiblement inhibée. La présente invention concerne également un phage vecteur qui inclut une séquence nucléotidique codant une séquence promotrice, un premier site de recombinaison, en aval et à proximité de la séquence promotrice, et un cadre de lecture ouvert pour cre recombinase, située en aval et à proximité du site de recombinaison, de telle sorte que le promoteur dirige l'expression de la Cre recombinase.

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