Method for production of antibodies to specific sites of...

C - Chemistry – Metallurgy – 07 – K

Patent

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Details

C07K 16/14 (2006.01) C12P 21/08 (2006.01) G01N 33/577 (2006.01)

Patent

CA 2286311

This invention relates to the production of polyclonal and monoclonal antibodies to specific sites of rapamycin (Sirolimus). The reactivity of these poly and monoclonal antibodies make them particularly useful for immunoassays for therapeutic drug monitoring (TDM). These immunoassays or TDM kits may include polyclonal or monoclonal antibodies to specific sites of rapamycin. These kits may also include various combinations of polyclonal antibodies, polyclonal and monoclonal antibodies or a panel of monoclonal antibodies. Rapamycin conjugate immunogens are prepared for the immunization of a host animal to produce antibodies directed against specific regions of the rapamycin molecule. By determining the specific binding region of particular antibody, immunoassays which are capable of distinguishing between the parent molecule, active metabolites, inactive metabolites and other structurally similar immunosuppressant compounds are developed. The use of divinyl sulfone (DVS) as the linker arm molecule for forming rapamycin-protein conjugate immunogens is described. DVS-linked rapamycin-protein conjugates were found to elicit antibodies with greater specificity to the rapamycin molecule than succinate linked conjugates.

La présente invention concerne la production d'anticorps polyclonaux et monoclonaux à des sites spécifiques de la rapamycine (Sirolimus). La réactivité desdits anticorps les rend particulièrement utiles dans des essais immunologiques permettant le contrôle d'un médicament thérapeutique (TDM). Ces essais immunologiques ou kits TDM peuvent contenir des anticorps polyclonaux et monoclonaux à des sites spécifiques de la rapamycine. Ces kits peuvent également contenir des combinaisons variées d'anticorps polyclonaux, d'anticorps polyclonaux et monoclonaux ou une série d'anticorps monoclonaux. Les immunogènes conjugués de la rapamycine sont préparés en vue de l'immunisation d'un animal hôte et ce, dans le but de produire des anticorps dirigés contre des régions spécifiques de la molécule de la rapamycine. Grâce à la détermination de la région de fixation spécifique d'un anticorps particulaire, on développe les tests immunologiques qui sont susceptibles de distinguer la molécule parent, les métabolites actifs, les métabolites inactifs et d'autres composés immunosuppresseurs présentant une structure similaire. L'invention se rapporte en outre à l'utilisation de divinylsulfone (DVS) en tant que molécule à bras de liaison permettant de former des immunogènes conjugués rapamycine-protéine. Il a été démontré que les conjugués rapamycine-protéine fixés sur la DVS déclenchent des anticorps présentant une plus grande spécificité à la molécule de rapamycine que les conjugués fixés sur le succinate.

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