G - Physics – 01 – N
Patent
G - Physics
01
N
G01N 33/49 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01)
Patent
CA 2207396
A method and device for the simultaneous and quantitative, flow cytometric analysis of nucleated red blood cells and white blood cells in a whole blood sample. The method includes the ly-sis of RBC and NRBC cytoplasm from an aliquot of a whole blood sample to eliminate RBC and to expose the NRBC to a vital nuclear stain and the in-hibition of the permeation of the nuclear stain into the WBC, subjecting the stained aliquot to flow cy-tometric light measurements, obtaining at least one signal for parameters including scattered light at a first and a second range of scatter angles and fluorescence (FL), qualifying the obtained signals by using the combination logic wherein a qualified sig-nal must be greater than the second scatter signal threshold, while at the same time it must be greater than either the first scatter signal threshold or the FL threshold {[(first scatter angle signal OR FL signals) AND second scatter angle signal]), constructing a three-dimensional plot of qualified intensity signals of fluorescence and scattered light from the detected signals, and differentiating the NRBC and WBC from the constructed three-dimensional plot and determining the number of cells of each.
Procédé et appareil d'analyse cytométrique de flux, simultanée et quantitive, de globules rouges nucléés (NRBC) et de globules blancs (WBC) dans un échantillon de sang total. Ce procédé consiste à réaliser la lyse du cytoplasme de globules rouges (RBC) et de NRBC d'une aliquote d'un échantillon de sang total pour éliminer les RBC et soumettre les NRBC à une coloration nucléaire vitale ainsi qu'à inhiber la pénétration du colorant nucléaire dans les WBC, à soumettre l'aliquote colorée à des mesures de la lumière par cytométrie de flux, à obtenir au moins un signal pour des paramètres incluant la lumière diffusée à une première et à une seconde gamme d'angles de diffusion et la fluorescence (FL), à qualifier les signaux obtenus au moyen de la logique combinatoire dans laquelle un signal qualifié doit être supérieur au second seuil de signal de diffusion, tout en devant être supérieur à l'un ou à l'autre du premier seuil de signal de diffusion et du seuil FL {[(premier signal d'angle de diffusion OU signaux FL) et second signal d'angle de diffusion]}, à construire une représentation tridimensionnelle des signaux d'intensité qualifiés de fluorescence et de lumière diffusée à partir des signaux détectés, à distinguer les NRBC et WBC à partir de cette représentation tridimensionnelle construite et à déterminer le nombre de cellules de chaque type.
Kantor Johanna
Kim Young Ran
Mehta Suresh N.
Sagala Josefino C.
Yee Michael W.
Abbott Laboratories
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l.,s.r.l./llp
LandOfFree
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