Method for rapidly screening microbial hosts to identify...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/78 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2685326

The present invention provides an array for rapidly identifying a host cell population capable of producing heterologous protein with improved yield and/or quality. The array comprises one or more host cell populations that have been genetically modified to increase the expression of one or more target genes involved in protein production, decrease the expression of one or more target genes involved in protein degradation, or both. One or more of the strains in the array may express the heterologous protein of interest in a periplasm compartment, or may secrete the heterologous protein extracellularly through an outer cell wall. The strain arrays are useful for screening for improved expression of any protein of interest, including therapeutic proteins, hormones, a growth factors, extracellular receptors or ligands, proteases, kinases, blood proteins, chemokines, cytokines, antibodies and the like.

La présente invention concerne un réseau permettant d'identifier rapidement une population de cellules hôtes capable de produire une protéine hétérologue à un rendement et/ou d'une qualité améliorés. Le réseau comprend une ou plusieurs populations de cellules hôtes qui ont été génétiquement modifiées pour accroître l'expression d'un ou de plusieurs gènes cibles impliqués dans la production des protéines, la diminution de l'expression d'un ou de plusieurs gènes cibles impliqués dans la dégradation des protéines, ou les deux. Une ou plusieurs des souches dans le réseau peuvent exprimer la protéine hétérologue d'intérêt dans un compartiment périplasmique, ou peuvent sécréter la protéine hétérologue extracellulairement à travers une paroi cellulaire extérieure. Les réseaux de souches sont utiles pour sélectionner par criblage une expression améliorée d'une protéine d'intérêt, comprenant les protéines thérapeutiques, les hormones, les facteurs de croissance, les récepteurs ou les ligands extracellulaires, les protéases, les kinases, les protéines sanguines, les chémokines, les cytokines, les anticorps et autres.

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